Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 01/04/2026
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-466625)
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Chez les patients atteints de schizophrénie ou d’autisme, le processus d’habituation, un type de mémoire, est impacté. Nous avons reproduit ce mécanisme d’habituation chez le poisson zèbre. Quand il est soumis à des éclairs ou des bruits, le poisson zèbre réagit en changeant de direction. Lorsqu’il est soumis de façon répétée à ces stimuli, cette réponse diminue, formant l’habituation. Suite à la recherche de gènes impliqués dans cette habituation, nous étudions 12 protéines. Dans ce projet, nous voulons générer des poissons zèbres avec des neurones où les gènes ciblés seront remplacés par de la fluorescence ce qui nous permettra d’étudier les effets des protéines invalidées sur l’habituation en évitant le génotypage par prélèvement de la nageoire.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Les défauts d’habituation observés dans les cas de pathologies psychiatriques comme la schizophrénie ou l’autisme chez l’homme nous montrent l’importance de cette étude. En comparaison des lignées classiques invalidées pour ces gènes, la création de ces lignées nous permettra non seulement de comprendre où sont localisées les protéines, d’étudier leur rôle tout en évitant un génotypage par biopsie de la nageoire caudale.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Aucune intervention ne sera réalisée sur les poissons âgès de plus de 5 jours.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Lors de la génération et l’élevage des individus mutant, aucun effet indésirable n’est attendu considérant nos résultats précédents avec des lignées similaires mais non fluorescentes. Toutefois, la création de ces lignées avec insertion d’une protéine fluorescente à la place du gène n’étant pas un simple knock-out, une surveillance 5 jours sur 7 sera réalisée par du personnel qualifié et l’expérimentateur avec pour points limites l’observation d’anomalies physiques du poisson (couleur de la peau anormale, hyperventilation, déformation morphologique du poisson, scoliose, siphose, blessure, femelles remplies d’oeufs), d’anomalies de son comportement (prostration, comportement de fuite) et d’une nage anormale dans l’aquarium (attitude de nage anormale, défaut de flottabilité), prostration au fond du bac à l’abri de la lumière.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Tous les animaux seront mis à mort à 12 mois pour éviter l’apparition de signes de vieillissement et donc d’impacter le bien-être des animaux.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
L’étude de la mémoire et du comportement ne peut pas être réalisée in vitro (sur des cellules en culture) et implique obligatoirement l’utilisation de modèles animaux vivants. Le poisson zèbre présente le modèle vertébré ayant un cerveau le plus simple nécessaire pour entreprendre ces expériences visant à comprendre les adaptions du cerveau des vertébrés face à des stimuli extérieurs. De plus, le cerveau et le génome du poisson zèbre présente des similarités avec celui de l’Homme.
2. Réduction
Afin de minimiser le nombre de poissons à élever, un tri des embryons âgés de moins de 5 jours et présentant une fluorescence appropriée sera réalisé (non soumis à une DAP). Ceci permettra de réduire drastiquement le nombre d’individus élevés et de garder après 5 jours de développement uniquement les poissons pour le maintien de la lignée et obtenir des alevins nécessaires aux études de comportement. Pour le maintien des lignées, nous faisons une nouvelle génération tous les 8 mois ce qui permet sur 5 ans de diminuer le nombre de générations. Pour surveiller le bien-être animal, nous observerons les poissons qui seront utilisés ensuite pour créer les générations suivantes.
3. Raffinement
Les poissons-zèbres générés et conservés devraient tous être sans phénotype dommageable d’après notre expérience précédente. Tous les individus sont regroupés dans des bacs de 3.5l pour être au minimum 8 par bac et au maximum 20 par bac. Une fois par jour des artémias vivants leur sont donnés afin de maintenir leur activité de prédation. Les nourrissages manuels assurés chaque jour permettront une observation régulière de chaque individu tout au long des procédures pour détecter une altération de la nage ou de la prise alimentaire. La mise en place de points de contrôle et de critères d’arrêt bien définis permettra d’assurer le maintien des animaux dans les meilleures conditions.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Les gènes de l’Homme et du poisson zèbre présentent de grandes similarités, le poisson zèbre constitue un modèle idéal pour étudier le fonctionnement du système nerveux humain. La fertilisation externe, avec des pontes de plus de 100 oeufs, permet de générer rapidement de nombreux individus par rapport à d’autres modèles tels que la souris et ainsi obtenir des résultats statistiquement très robustes. Enfin, la transparence des larves permet un suivi non invasif en temps réel du système nerveux, ce qui nous permettra de relier les événements dans les neurones avec le comportement d’apprentissage de l’animal. Notre objectif est de maintenir des couples reproducteurs qui nous permettrons de générer des individus de moins de 5 jours pour les études de comportement (hors cadre). Ainsi, ces reproducteurs seront gardés jusqu’à 12 mois; avant l’apparition de signes de vieillesse.