Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 19/09/2023
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-750959)
258 souris vont être utilisées, toutes tuées à l’issue, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance déclaré léger. Leurs plaquettes sont détruites par un anticorps puis remplacées par des plaquettes humaines, avant l’injection d’un candidat médicament antithrombotique et plusieurs prélèvements de sang, pour tester son effet dans un modèle de thrombose artérielle. Le porteur indique que les effets attendus se limitent à un stress et une douleur brefs aux points d’injection. Il affirme qu’aucun modèle de substitution n’existe pour mesurer l’effet d’une substance sur la thrombose artérielle et qu’il n’a donc pas d’autre choix que la souris.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Les plaquettes sanguines joue un rôle primordial d’une part en physiologie dans le maintien de l’intégrité vasculaire et de la coagulation et en pathologie dans la formation des thromboses. Les maladies cardiovasculaires (MCV), majoritairement constituées par les accidents vasculaires cérébraux et les infarctus du myocarde sont la première cause de mortalité dans le monde. A elles seules les MCV ont été responsables d’environ 17,5 millions de décès en 2012 selon l’Organisation Mondiale de la Santé, soit 31% de l’ensemble des décès et pourraient atteindre 23,3 millions en 2030. Au vu de ce constat, il est aujourd’hui essentiel de découvrir de nouvelles approches thérapeutiques antithrombotiques dirigées contre des cibles moléculaires originales impliquées dans ces processus. Il existe actuellement des traitements antithrombotiques qui permettent de diminuer la fréquence de survenue d’évènements thrombotiques, cependant ces traitements doivent être finement régulés car ils augmentent le risque de saignement. D’ou l’importance d’identifier de nouvelles cibles pharmacologiques et de développer de nouveaux outils thérapeutiques plus efficaces. Ce projet de recherche a pour objectif d’étudier le potentiel antiagrégant plaquettaire et antithrombotique d’un nouvel agent médicamenteux inhibant l’intéraction entre une protéine identifiée comme étant impliquée dans les processus thrombotiques, et son récepteur, dans un modèle de souris humaniées. L’activité antithrombotique de ce nouvel agent médicamenteux a été démontré dans deux modèles murins de maladies artérielles de thromboses. Cependant, des différences inhérentes entre les plaquettes de souris et les plaquettes humaines limitent l’utilisation d’un tel modèle. Par conséquent, nous évaluerons plus avant l’efficacité antithrombotique de ce nouvel agent médicamenteux dans un modèle de souris humanisées. Actuellement aucun modèle de substitution n’existe pour mesurer l’effet d’une substance sur le phénomène complexe qu’est la thrombose artérielle. Nous n’avons donc pas d’autre choix que d’utiliser un modèle animal pour apporter la preuve de concept de l’efficacité thérapeutique de cette molécule.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Les bénéfices attendus par notre candidat peptide sont une diminution du temps nécessaire à une occlusion thrombotique totale de l’artère carotidienne, ainsi qu’une diminution du nombre de caillots liée à une diminution de l’agrégation des plaquettes. La réalisation de ce projet d’expérimentation animale permettrait de valider les résultats obtenus précédemment et ainsi de démontrer l’effet antithrombotique de notre candidat peptide dans un modèle de souris humanisée, et ainsi permettre de lever les limites liées aux différences inhérentes entre les plaquettes humaines et les plaquettes murines.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Procédure 1 (pour toutes les souris) : – Injection intraveineuse des différents traitements (1 fois) Procédures 2 : – Pour 1 groupe de souris, injection intraveineuse du traitement (1 fois) – Pour les deux autres groupes de souris, administration orale des différents traitements (1 fois) Pour toutes les procédures et toutes les souris : – administration orale d’antagoniste du récepteur du facteur d’activation plaquettaire (1 fois) – injection intraveineuse d’anticorps contre les plaquettes pour déplétion – Injection intra-veineuse de plaquettes humaines (2 fois) – Prélèvement de sang (2 fois) – Injection intra péritonéal des anesthésiques (1 fois)
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Les effets indésirables peuvent être un stress physique ou thermique de courte durée, et une douleur de courte durée à l’endroit des injections.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
À la fin de l’expérimentation, l’ensemble des animaux seront euthanasiés.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Ce projet s’inscrit dans la continuité des études menées au laboratoire sur ce candidat médicament. Ces expériences visent à confirmer la pertinence d’une stratégie thérapeutique basée sur l’utilisation du candidat peptide dans un modèle de thrombose carotidienne induite chimiquement dans un modèle murin. Actuellement, aucun modèle de substitution n’existe pour mesurer l’effet d’une substance sur le phénomène complexe qu’est la thrombose artérielle. Nous devrons donc avoir recours à un modèle animal. À terme, la réalisation de ce projet scientifique pourrait mener au développement d’un nouveau traitement des pathologies thrombotiques.
2. Réduction
Le nombre d’animaux par expérience est limité par la quantité de plaquette obtenu à partir d’un donneur (injection de 3 souris au maximum avec les plaquettes d’un seul et même donneur). Par ailleurs le nombre de donneurs nécessaires pour l’étude a été calculé de manière à réduire au maximum la quantité d’animaux, en se basant sur des données préalablement obtenues, tout en permettant une interprétation fiable des résultats basée sur des analyses statistiques adaptées.
3. Raffinement
Une observation quotidienne des souris sera réalisée afin de garantir leur bien-être et détecter d’éventuels signes de douleur ou de stress. L’utilisation d’anesthésiques, d’analgésiques et d’antalgiques permettra de prévenir et/ou traiter toute douleur éventuelle. Un soin sera apporté aux conditions d’hébergement permettant de limiter le stress (enrichissement du milieu de vie, respect de leur vie en groupe, surveillance quotidienne).
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Le modèle (souris humanisées avec des plaquettes d’origine humaine) choisi est le modèle de référence pour l’étude de propriétés antithrombotiques d’un candidat médicament. D’autre part l’animalerie est agrémentée pour les différentes espèces de souris sauvages et transgéniques. Ce modèle permet enfin de limiter la quantité de substances à utiliser (peptides synthétiques). Dans le but de se placer dans des conditions expérimentales les plus représentatives de la réalité physiologique, les souris seront utilisées à l’âge de 8 semaines, ce qui correspond à un stade adulte (jusqu’à environ 1 an chez la souris).