Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 10/01/2025
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-964201)
La lignée élevée dans ce projet porte un phénotype dommageable dont la nuisance déclarée est une anxiété accrue, compensée selon le porteur par des huttes en carton supplémentaires et un niveau sonore bas. 90 souris vont être utilisées dans des procédures impliquant un niveau de souffrance légère. Chaque souriceau subit, entre son septième et son dixième jour de vie, une biopsie de la queue de quelques secondes, avec une douleur légère et un risque de saignement, le porteur situant l’intervention à un âge où les terminaisons nerveuses sont encore peu nombreuses. Toutes seront tuées, pour prélever des tissus cérébraux destinés à l’étude de la protéine Tau dans la maladie d’Alzheimer, ou parce que leur fertilité décline au-delà de six mois.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Les objectifs de sce projet sont : 1) méthode de génotypage invasive 2 ) maintien de la lignée Tau22 à phénotype dommageable sous forme respirante et de tirer profit des animaux générés par les accouplements d’élevage et par les animaux reproducteurs reformés pour effectuer un prélèvement de tissus à l’âge adulte.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Les bénéfices attendus seront 1) la caractérisation génétique de la lignée pour l’optimisation de la gestion de son élevage et pour la production pour fournir des animaux pour nos projets scientifiques (utilisation continue vers des DAP expérimentation) 2) maintenir notre lignée de souris à phénotype dommageable pour l’étude des mécanismes autophagiques impliqués dans la dégradation de la protéine Tau pathologique au cours du développement de la maladie d’Alzheimer, ce qui permettra à terme d’identifier des stratégies thérapeutiques dans les maladies neurodégénératives comme la maladie d’Alzheimer
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Les animaux subiront une seule fois, une biopsie à la queue entre leur 7ieme et 10ieme jours lorsqu’ il y a encore peu de terminaisons nerveuses à ce niveau afin de limiter la douleur. Cette procédure durera que quelques secondes.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Les animaux subissent une biopsie avec comme nuisances une douleur légère de courte durée avec un risque de saignements. La nuisance liée au phénotype dommageable de ces souris sera une anxiété plus accrue.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Mise à mort pour prélèvement de tissus cérébraux et suite au déclin de la maturité sexuelle
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Dans la maladie d’Alzheimer, une protéine anormale, Tau, s’agrège et se propage de neurone en neurone. Cette protéine Tau est le principal constituant des neurones en dégénérescence neurofibrillaire dans la maladie d’Alzheimer. Ces neurones sont envahis d’amas protéiques en forme de filaments qui bloquent le fonctionnement neuronal. Aujourd’hui, les mécanismes qui aboutissent à l’agrégation de Tau et à la formation de ces lésions demeurent inconnus et il est donc très difficile de reproduire ces changements de la protéine Tau in vitro. C’est pourquoi le prélèvement de tissus cérébraux de souris Alzheimer est important pour détecter cette forme pathologique de Tau et pour mieux comprendre comment favoriser la dégradation de cette protéine Tau en étudiant directement ses interacteurs in vivo (dans ce projet la protéine autophagique NDP52 sera étudiée). En fonction du génotypage les animaux seront utilisés pour les accouplements.
2. Réduction
Le nombre d’animaux sera limité au strict nécessaire par une gestion appropriée des plannings de reproduction et des accouplements réalisés afin de maximiser la production de génotypes utiles. Le projet fournira aussi de façon régulière des tissus cérébraux servant de base pour les expériences réalisées au laboratoire, par conséquent aucune analyse statistique n’est prévue sur les animaux utilisés dans ce projet. Enfin, cette lignée transgénique sera cryoconservée, ce qui permettra de ne pas maintenir sous forme respirante la lignée lorsque nous aurons terminé nos analyses.
3. Raffinement
Les animaux reproducteurs seront habitués à l’expérimentateur par une routine d’élevage (toujours le même expérimentateur, toujours le même jour d’accouplement, à la même heure) ce qui permet de diminuer le stress des animaux. Une manipulation régulière, par contention douce (dans le creux de la main ou dans un tube en carton servant d’enrichissement) sera privilégiée comme méthode de manipulation des animaux. La taille de la biopsie, à l’extrémité de la queue, sera limitée à un millimètre. Pour pallier à l’anxiété possible des souris Tau22, les souris auront un enrichissement renforcé : ajout de plusieurs huttes ou tubes en carton en fonction du nombre d’animaux /cages ; elles seront maintenues en groupe et des niveaux sonores bas seront privilégiés au sein de la structure.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Le choix d’un modèle de souris est justifié car il s’agit d’une espèce dont l’architecture cérébrale est proche de l’architecture du cerveau humain (en particulier l’hippocampe). Par ailleurs la souris présente un développement embryonnaire rapide (21 jours). Les animaux seront sélectionnés à l’âge de maturité sexuelle (6 semaines chez les mâles, 7 semaines chez les femelles) et utilisés en reproduction préférentiellement jusqu’à l’âge de 6 mois, après quoi la fertilité diminue et les animaux seront réformés. En cas de besoin les animaux pourront être mis en reproduction après 6 mois, en l’absence de reproducteurs plus jeunes disponibles. Les tissus seront prélevés principalement sur des animaux à des âges adultes allant de 3 à 12 mois.