Procédures sévères

Pour suivre le trajet des microplastiques inhalés dans des poumons malades, 110 rats vont être utilisés dans des procédures impliquant un niveau de souffrance modéré à sévère, tous tués à l'issue. Sous anesthésie, chacun reçoit cinq instillations de particules dans la trachée en cinq semaines, un composé qui déclenche une inflammation des poumons, et des échographies du cœur. Les mesures respiratoires finales se font par trachéotomie, sans réveil. Une perte de poids ou une détresse respiratoire sévère déclenche la mise à mort, sans que le seuil de poids soit chiffré.

Objectifs

L’air que nous respirons est de plus en plus pollué : fumées d’usines, poussières fines, et surtout microplastiques (des morceaux de plastique invisibles à l’œil nu). En France, nous en inhalons 30 000 par jour, et jusqu’à 2,8 millions en Chine ! Pourtant, on ne connaît pas encore bien leurs effets sur la santé. Que se passe-t-il dans notre corps ? Ces particules, une fois respirées, peuvent s’enfoncer profondément dans les poumons, affaiblir nos défenses immunitaires, provoquer des inflammations ou des maladies comme l’asthme ou la BronchoPneumopathie Chronique Obstructive (BPCO, une maladie pulmonaire chronique), et enfin passer dans le sang, avec des risques encore mal compris pour le cœur et les vaisseaux sanguins. Les objectifs du projet sont donc les suivants : 1/Comment le corps (poumons et système cardiovasculaire) réagit-il à ces microplastiques, chez une personne en bonne santé ou atteinte de BPCO ? 2/ Où ces particules se propagent-elles dans l’organisme ? 3/ Quels sont les effets sur le fonctionnement des poumons et du cœur ? Les résultats seront comparés à des analyses de tissus pulmonaires de patients atteints de BPCO, pour mieux comprendre les risques réels.

Bénéfices attendus

Le projet vise à étudier la distribution des particules fines d’origine microplastique dans l'organisme et d’approfondir notre compréhension des mécanismes impliqués dans les effets cardiopulmonaires. Cette étude permettra d’identifier les altérations inflammatoires, structurelles et fonctionnelles induites par ces particules, en mettant en évidence leur impact sur les voies physiopathologiques sous-jacentes. Elle contribuera également à mieux cerner les risques associés à une exposition chronique, offrant ainsi des perspectives pour l’évaluation des dangers environnementaux et la mise en place de stratégies de prévention en santé publique. Les résultats obtenus avec le modèle animal seront mis en perspective avec des données obtenues sur des biopsies humaines de patients BPCO.

Procédures

Quand l’animal est éveillé, on observera sa respiration pendant environ 15 minutes dans un espace dédié. Sous anesthésie, on introduira des particules dans la trachée (environ 10 minutes par administration, soit 5 administrations par animal réparties sur 5 semaines) et on lui administrera un composé qui induira une inflammation pulmonaire. On examinera son cœur à l’aide d’échographie sous anesthésie, pendant environ 15 minutes par animal. Pour les mesures terminales de mesure des paramètres respiratoires, ces expérimentations seront faites par la méthode de trachéotomie sur les animaux anesthésiés. L’animal ne se réveillera pas après ces mesures, qui durent environ dix minutes.

Impact sur les animaux

Les animaux peuvent ressentir du stress ou de l’inconfort, par exemple lorsqu’ils sont manipulés, maintenus dans les chambres d’exploration, ou lors de mesures et prélèvements. Une agitation excessive ou persistante est surveillée pour garantir leur bien-être. Les animaux peuvent présenter des symptômes transitoires liés au modèle de maladie respiratoire chronique, tels qu'une gêne respiratoire modérée, une augmentation de la fréquence respiratoire, une diminution de l'activité physique et une perte de poids. Une perte de poids ou l'apparition de signes de détresse respiratoire sévère constituent des points limites et entraîneront l'euthanasie de l'animal.

Devenir

Tous les animaux seront euthanasiés en fin de procédure. Différents organes (cœur, poumons, muscles, vaisseaux sanguins) seront prélevés pour d’autres études. Ce processus est essentiel pour obtenir une compréhension détaillée des éventuelles altérations tissulaires et pour évaluer les atteintes pulmonaires et cardiaques consécutives à l’exposition aux microplastiques.

Remplacement

La BPCO est une maladie complexe mettant en jeu différents types cellulaires qui ne peuvent pas être étudiés in vitro. Le modèle rat BPCO permettra d’élucider les mécanismes complexes conduisant au remodelage des poumons. Parallèlement à ce protocole in vivo, des études in vitro sur les cellules pulmonaires de patients BPCO pourront être réalisées afin de valider les observations réalisées chez les animaux.

Réduction

Nous avons conçu ce projet de manière à utiliser le moins d'animaux possible. Plusieurs mesures et analyses seront réalisées sur chaque animal afin d'obtenir un maximum d'informations à partir d'un même individu. Cette approche permet de réduire le nombre d'animaux nécessaires tout en garantissant la qualité scientifique des résultats. De plus, se souciant de réduire le nombre des animaux en expérimentation, après la mise à mort, nous réaliserons de multiples études ex vivo sur différents organes

Raffinement

Un suivi quotidien sera réalisé par des personnes formées, compétentes et soucieuses du bien-être animal, basées notamment sur l’apparence physique externe, la prise de poids et le comportement des animaux. Ces contrôles permettent de repérer tout animal en inconfort, d’en avertir le responsable du projet et de prendre les mesures appropriées. Des protocoles d’habituation ont été mis en place pour que les animaux s’habituent aux procédures et réduire leur stress. Afin d’éviter tout inconfort, les animaux seront analgésiés puis anesthésiés lors des procédures. L’analgésie sera maintenue post-opératoire si nécessaire en fonction de l’état des animaux par rapport aux points limites.

Choix des espèces

Ce projet s'interesse à l'interaction entre le coeur et les poumons. Le modèle de rat est largement utilisé et bien caractérisé sur le plan cardiovasculaire. Sa physiologie cardiaque présente de nombreuses similitudes avec celle de l’Homme, tant sur le plan de la régulation que de l’organisation anatomique et fonctionnelle du cœur, permettant l’étude approfondie des mécanismes impliqués, de l’échelle moléculaire aux mesures in vivo. Les études seront réalisées sur des rats adultes mâles et femelles âgés de 8 semaines

Ouverts à l'abdomen pour une ligature du canal biliaire, 1 040 rats développent ensuite une jaunisse et une fibrose du foie. Ils sont utilisés dans des procédures impliquant un niveau de souffrance modéré à sévère, et tous sont tués à l'issue. Le porteur affirme que les rats "se remettent très bien de la chirurgie", puis décrit dans le même paragraphe un possible gonflement de l'abdomen par déchirement du sac résiduel. Trois à quatre semaines après l'opération, une injection de LPS mimant une infection bactérienne majeure provoque prostration et troubles de la température, et chaque rat est observé jusqu'à 24 heures : mis à mort au point limite, sa durée de survie servant de mesure, ou tué à la fin s'il survit.

Objectifs

La cirrhose hépatique est une maladie chronique caractérisée par le développement progressif d’une fibrose hépatique, conduisant à une altération de l’architecture du foie, à des perturbations de la circulation sanguine intra-hépatique et, à terme, à une insuffisance hépatique. Les patients peuvent évoluer vers une décompensation aiguë, pouvant conduire à une insuffisance hépatique aiguë sur maladie chronique (ACLF, Acute-on-Chronic Liver Failure), syndrome grave associé à des défaillances multiples d’organes et à une mortalité élevée. La fibrose résulte d’agressions hépatiques répétées ou continues entraînant une accumulation excessive de matrice extracellulaire et la formation d’un tissu cicatriciel non fonctionnel. Parmi les causes de fibrose, la cholestase induite par une obstruction des voies biliaires provoque une accumulation d’acides biliaires toxiques, responsable de lésions hépatiques, d’inflammation et d’une progression rapide vers la cirrhose. Afin de mieux comprendre les mécanismes impliqués dans la décompensation de la cirrhose et de développer de nouvelles approches thérapeutiques, des modèles expérimentaux reproduisant les principales caractéristiques de la maladie humaine sont nécessaires. La ligature du canal cholédoque chez le rat est un modèle reconnu permettant d’induire rapidement une fibrose hépatique et une cirrhose présentant des similitudes avec la cirrhose biliaire humaine, constituant ainsi une étape essentielle pour l’étude de l’ACLF.

Bénéfices attendus

Ce projet a pour objectif de mettre en évidence une efficacité de nos molécules d'intérêt afin d'améliorer la qualité de vie des patients atteints d'ACLF, de diminuer l'inflammation, de retarder voire stopper la défaillance multi-organes et de prolonger la survie des patients.

Procédures

Les animaux subiront une chirurgie d'une durée de 30mn par animal, lors de laquelle ils seront ouverts au niveau de l'abdomen pour effectuer une ligature du canal biliaire. Cette dernière se fait sous anesthésie générale gazeuse et sous analgésie avec un dérivé morphinique. L'analgésie se poursuivra au cours des 3 jours suivant l'opération. 2 semaines après la chirurgie, ils auront un prélèvement de sang toujours sous anesthésie de l'ordre de 0.75 à 1mL. 3 à 4 semaines post chirurgie, ils subiront le challenge ACLF par injection d'un agent précipitant. Le traitement avec la molécule testée sera appliqué soit par voie orale, soit par voie intrapéritonéale, pour ces voies l'administration dure environ 5s, soit par voie intraveineuse et durera environ 10 à 15s. Des micro-prélèvements à la veine de la queue ou à la veine saphène (intérieur de la cuisse) pourront être réalisés, ils seront de très faible volume, de l'ordre de quelques gouttes, d'une durée de 10s chacun et seront de 6 au maximum. Enfin, après anesthésie générale, le sang des animaux sera prélevé avant mise à mort sous sédation.

Impact sur les animaux

Le modèle est réalisé en deux phases : 1) La première phase correspond à la chirurgie lors de laquelle la ligature du canal biliaire est réalisée, entrainant par la suite ,une accumulation de bile au niveau hépatique responsable du développement de la fibrose. La chirurgie est réalisée sous anesthésie gazeuse, une analgésie est prévue en amont et en aval de la chirurgie, la prise en charge de la douleur est assurée et les animaux se remettent très bien de la chirurgie. Ils développent ensuite une jaunisse. L’intervention qui est réalisée peut dans certains cas provoquer le gonflement de l’abdomen de l’animal, cela peut être le reflet du déchirement du sac résiduel qui se forme après l’opération. 2) La seconde phase qui correspond à la précipitation de l'ACLF par injection du composé qui mime un infection bactérienne majeure (LPS) est par définition aigue. Elle génère rapidement des signes de stress et d'inconfort chez le rat (trouble de la régulation de la température corporelle, prostration, pâleur des muqueuses etc). Ces effets sont évalués et scorés à la fois dans le but de grader la sévérité ce qui reflète aussi un effet pharmacologique du produit testé, et pour évaluer les points d'arrêts anticipés ou points limites.

Devenir

A l'issue de la procédure expérimentale, les animaux seront observés au cours d'une période de 24heures maximum après le déclenchement de la phase aigue de la défaillance multi organe. Cette phase d'observation se traduira soit par la mise à mort de l'animal pour atteinte des points limites (avec mesure de la durée de survie = étude de survie) soit par une mise à mort pour les animaux survivants. La justification repose sur l'objectif de ce projet qui consiste à évaluer les effets de composés sensés réduire la mortalité lors de défaillance aigue de l'organisme. Les animaux qui survivent seront mis à mort et seront nécropsiés.

Remplacement

La possibilité de disposer d’un modèle animal qui permet d’évaluer les effets des nouveaux composés sur tous les aspects d'une pathologie présente chez l’homme constitue une étape clé dans la lutte contre ces maladies et font de nos modèles un outil translationnel très pertinent. Nous ne disposons pas actuellement de modèles in vitro ayant des caractéristiques permettant d'évaluer les propriétés de composé sur l'ACLF. Une première phase de sélection des meilleurs composés est effectuée sur des modèles acellulaires ou cellulaires, et même sur des modèles de tyoe organoïdes contribuant ainsi à l’utilisation de méthodes alternatives visant à remplacer partiellement l’utilisation des animaux. L’évaluation finale du potentiel thérapeutique des produits dans des modèles animaux reste cependant nécessaire. L’administration des composés dans le contexte d’un animal vivant permet d’évaluer la réelle efficacité des composés dans un système biologique complexe et «global ».

Réduction

La stratégie de réduction consiste à ne réaliser que les essais avec les composés les plus prometteurs ayant satisfait aux étapes de sélection préliminaires in vitro. La chimie des médicaments peut produire des familles de composés chimiques très importante, la stratégie de sélection de produits intéressants à l’aide de tests in vitro exclut une très grande majorité des produits et diminue donc drastiquement le nombre de tests à réaliser chez l’animal.

Raffinement

Les chirurgies sont réalisées sous anesthésie gazeuse sur tapis chauffant. L'anesthésiant est mélangé à de l'oxygène au lieu d'air pour permettre une meilleure oxygénation de l'animal. Une pré-médication est réalisée en amont, 30mn avant le début de la chirurgie. Les animaux reçoivent également une injection en sous-cutané de Ringer Lactate afin d'éviter toute deshydratation et en reçoivent potentiellement une seconde en sortie de chirurgie si nécessaire. Un anesthésique local est appliqué au niveau de la laparotomie. Le principal raffinement dans ce projet se traduit par la méthode d'administration de l'analgésie en post op grâce à l'implantation de pompes osmotiques permettant une diffusion lente et constante d'un dérivé morphinique durant 48h. Des gels nutritifs sont fournis pour aider à la récupération après la chirurgie. La température de la zone d'hébergement est relevée à 22°C toujours pour que les animaux se remettent au mieux de la chirurgie. Les animaux sont identifiés à l'aide de puce RFID permettant la prise de température facile lors de l'épisode d'ACLF. Lors de l'épisode d'ACLF, les animaux sont observés selon une grille de scoring permettant d'évaluer les points d'arrêt anticipés précoces.

Choix des espèces

Sur la base de la littérature scientifique, aucun modèle invertébré ne permet à ce jour dans le cadre de la cirrhose du foie de valider l’efficacité d’une nouvelle molécule dans le traitement de cette pathologie. Le génome du rat et celui de l'homme ont 90% de leurs gènes en commun et ces derniers sont présents dans le même ordre sur les chromosomes, ce qui fait des petits rongeurs un modèle de choix dans les études pharmacologiques. Le choix de l'espèce rat a été fait en se basant sur la littérature scientifique et sur nos connaissances des caractéristiques des molécules à tester. Les rats sont agés de 5 à 6 semaines (poids 250-275g), à ce stade la masse adipeuse n'est pas trop élevée.

Anesthésiées, des souris reçoivent par le nez un agent qui déclenche une fibrose pulmonaire, sur deux ou cinq jours, puis sont pesées trois fois par semaine et, pour beaucoup, suivies en imagerie deux fois par semaine sous anesthésie. Une partie reçoit en plus un traitement contre les cellules sénescentes, par voie orale ou par injection quotidienne pendant deux à quatre semaines. Au total, 1 812 souris, jeunes de deux mois ou âgées de 18 mois, dont des lignées génétiquement modifiées, vont être utilisées dans des procédures impliquant un niveau de souffrance modéré à sévère, la fibrose pouvant provoquer une gêne respiratoire jusqu'à sévère. Le porteur intègre à ses effectifs des "pertes attendues liées à l'âge des animaux et aux procédures expérimentales". Après 14 à 74 jours de suivi, toutes sont tuées pour prélever leurs poumons.

Objectifs

La fibrose pulmonaire idiopathique est une maladie grave des poumons qui évolue progressivement et dont la fréquence augmente avec l’âge. Elle se caractérise par une cicatrisation anormale du tissu pulmonaire, ce qui rend la respiration de plus en plus difficile. Chez les personnes âgées, non seulement la maladie est plus sévère, mais le poumon a aussi plus de mal à se réparer, ce qui favorise l’installation durable des lésions. Des travaux récents suggèrent qu’un processus appelé « sénescence cellulaire » joue un rôle important dans ce phénomène. Il s’agit de cellules qui, au lieu de disparaître, restent dans les tissus et produisent des signaux favorisant l’inflammation et la fibrose. Dans des expériences préliminaires réalisées chez la souris, nous avons observé que ces cellules apparaissent en même temps que la fibrose et pourraient contribuer à son maintien. Nous faisons l’hypothèse que, dans le poumon âgé, ces cellules s’accumulent dans des zones spécifiques des lésions et empêchent leur guérison en maintenant un environnement défavorable à la réparation. L’objectif de ce projet est de mieux comprendre quelles sont ces cellules, où elles se regroupent dans le poumon, comment elles interagissent entre elles et avec leur environnement, et quels mécanismes biologiques entretiennent la fibrose. Pour cela, le projet se déroule en deux temps. Dans un premier temps, un nombre restreint d’animaux reçoit uniquement la substance qui déclenche la fibrose, sans aucun traitement, afin d’identifier et de cartographier précisément ces cellules sénescentes ainsi que les zones où elles s’accumulent au fil du temps. Dans un second temps, des traitements destinés à éliminer ou à neutraliser ces cellules sont évalués afin de déterminer s’ils aident le poumon à mieux se réparer. À terme, ces travaux pourraient permettre d’identifier de nouvelles cibles thérapeutiques pour améliorer la prise en charge de cette maladie.

Bénéfices attendus

Ce projet vise à mieux comprendre le rôle de certaines cellules particulières, dites « sénescentes », dans la persistance des lésions de fibrose pulmonaire. Il permettra d’identifier précisément les différents types de cellules impliqués, de décrire leur organisation au sein du tissu pulmonaire, de comprendre comment leur présence évolue au cours du temps et comment elles participent au maintien des lésions fibrotique. Les résultats obtenus contribueront à mieux expliquer pourquoi, avec l’âge, le poumon perd sa capacité à réparer correctement les lésions et évolue vers une fibrose chronique plutôt que vers une guérison. À plus long terme, ces travaux devraient améliorer la compréhension des mécanismes de la fibrose pulmonaire et du vieillissement. Ils pourraient également permettre d’identifier de nouvelles pistes thérapeutiques. Ces avancées sont particulièrement importantes car les traitements actuellement disponibles pour la fibrose pulmonaire idiopathique restent limités et ne permettent pas de guérir la maladie.

Procédures

Après leur arrivée, l'ensemble des animaux (1812 souris) est acclimaté à son nouvel hébergement pendant 7 à 10 jours. Une première étape consiste à administrer, sous anesthésie légère, soit un agent inducteur de fibrose pulmonaire, soit une solution de contrôle, par voie nasale. Selon les groupes, cette administration a lieu sur 2 jours, ou sur 5 jours avec une pause d'un jour au milieu de cette période. Les animaux sont ensuite pesés trois fois par semaine pendant toute la durée du suivi. Pour une partie des animaux, un traitement expérimental visant à cibler les cellules vieillissantes impliquées dans la fibrose est ensuite administré, soit par voie orale pendant plusieurs jours consécutifs suivis d'une pause de deux semaines, soit par injection quotidienne pendant deux à quatre semaines. Le moment de début de ce traitement varie selon le groupe, entre quelques jours avant et plusieurs jours après l'induction de la fibrose. Pour un grand nombre d'animaux, la progression de la sénescence cellulaire est suivie de manière non invasive par imagerie, deux fois par semaine, sous anesthésie de courte durée (environ 30 minutes au total, incluant la préparation et l'acquisition d'image). La durée totale de suivi d'un animal varie de 14 à 74 jours selon son groupe, ce délai correspondant au temps nécessaire pour observer les différentes phases de la fibrose pulmonaire : son apparition, son intensité maximale, puis sa réparation ou sa persistance selon les groupes.

Impact sur les animaux

Les animaux recevront des administrations par voie orale, des injections et des administrations intranasales sous anesthésie légère afin d’induire une fibrose pulmonaire et de suivre son évolution. Ces procédures peuvent entraîner un stress léger et transitoire lié à la manipulation et à la contention. L’induction de la fibrose peut provoquer une perte de poids, une diminution transitoire de l’activité et une gêne respiratoire modérée à sévère. Les animaux seront surveillés régulièrement tout au long de l’étude, avec une surveillance renforcée après les administrations. Les traitements seront administrés selon des schémas intermittents afin de limiter les effets indésirables potentiels. Les anesthésies gazeuses nécessaires aux procédures d’imagerie seront de courte durée et réalisées de manière à limiter l’inconfort des animaux.

Devenir

A la fin de chaque procédure, les animaux seront mis à mort afin de prélever les poumons dans le but d’étudier la fibrose et la sénescence dans ces organes.

Remplacement

L’objectif du projet est d’identifier et de caractériser les populations cellulaires impliquées dans la persistance de la fibrose pulmonaire, leurs interactions et leur évolution au cours du temps. L’étude de ces mécanismes nécessite le recours à l’expérimentation animale. En effet, les modèles cellulaires ne permettent pas de reproduire la complexité de la fibrose pulmonaire, qui implique de nombreux types cellulaires interagissant de manière dynamique au sein d’un organisme entier.

Réduction

Les méthodes utilisées dans ce projet reposent sur des protocoles déjà validés et largement utilisés afin de limiter le nombre d’animaux nécessaires tout en garantissant des résultats fiables. Un système d’imagerie permettant de suivre les mêmes animaux au cours du temps sera utilisé afin de réduire le nombre total d’animaux inclus dans l’étude. Certaines analyses nécessitent toutefois le prélèvement des poumons à différents moments de l’étude. Le nombre de ces prélèvements a été limité et optimisé afin de respecter le principe de réduction du nombre d’animaux utilisé en expérimentation. Le nombre d’animaux a été déterminé à l’aide d’une méthode statistique permettant d’utiliser uniquement l’effectif nécessaire pour obtenir des résultats interprétables. Les effectifs ont également été ajustés afin de prendre en compte les pertes attendues liées à l’âge des animaux et aux procédures expérimentales. Au total, ce projet, prévu sur une durée de 5 ans, impliquera un maximum de 1812 souris.

Raffinement

Le personnel impliqué dans ce projet est qualifié sur le plan technique et formé en continu sur les pratiques en expérimentation animale. Afin de limiter au minimum toute souffrance, stress ou angoisse des animaux, ces derniers seront hébergés selon les recommandations établies à raison de maximum 5 animaux par cage dans un environnement enrichi avec des cotons de nidification, et dans des conditions classiques de stabulation (température régulée, cycle jour/nuit). Avant toute manipulation, les animaux seront acclimatés de 7 à 10 jours dans leur salle d’hébergement. Les animaux seront manipulés individuellement avant la mise en place de l’expérimentation et dans une pièce séparée des autres animaux afin de réduire leurs stress et angoisse. Un suivi quotidien des animaux sera réalisé de manière à s’assurer qu’ils ne présentent pas de signes de souffrance nécessitant l’arrêt des procédures et leur mise à mort. La souffrance sera évaluée par l’observation de paramètres de poids, de comportement et d’apparences reportés dans une grille standard permettant d’établir un score à ne pas dépasser. Tout animal dépassant ce score sera exclu du protocole et mis à mort.

Choix des espèces

Le modèle murin est couramment utilisé pour l’étude de la fibrose pulmonaire car il reproduit plusieurs caractéristiques observées chez l’Homme au cours de cette maladie. Pour étudier la sénescence cellulaire, des souris génétiquement modifiées permettant de suivre cet état cellulaire par imagerie non invasive seront utilisées. L’étude sera réalisée chez des souris jeunes adultes ainsi que chez des souris âgées afin de mieux comprendre l’impact du vieillissement sur l’apparition et la persistance de la sénescence cellulaire au cours de la fibrose pulmonaire. Nous utiliserons des souris jeunes adultes (2 mois), c’est-à-dire après la phase de croissance ainsi que des souris âgées (18 mois) afin de pouvoir étudier l’impact du vieillissement sur la cinétique d’apparition et de persistance de la sénescence cellulaire après une lésion fibrosante, et si la sénescence contribue à l’évolution vers une fibrose non résolutive.

4 128 souris vont être utilisées, toutes tuées à l'issue, et une partie d'entre elles reçoit une injection par semaine pendant douze mois, une prise de sang mensuelle et jusqu'à trois tests comportementaux par semaine, jamais nommés. D'autres développent après injection une maladie inflammatoire du système nerveux : perte de poids, queue sans tonus, pattes arrière affaiblies jusqu'à la paralysie possible. Aucun antidouleur ne leur est donné, pour ne pas fausser la réponse immunitaire étudiée, et le seuil de mise à mort est fixé à la paralysie des pattes avant et arrière, à une perte de poids importante ou à l'incapacité de boire et manger seule. Les procédures impliquent un niveau de souffrance modéré à sévère, pour des traitements contre la sclérose en plaques que le porteur renvoie au conditionnel et au "long terme".

Objectifs

La sclérose en plaques touche un grand nombre de personnes et représente un enjeu important de santé publique. Dans cette maladie, le système immunitaire, qui est normalement chargé de défendre l’organisme contre les infections, devient trop actif et attaque certains tissus du corps. Cette inflammation persistante peut entraîner une dégradation progressive des organes ou des tissus concernés et conduire à des douleurs, une perte de fonction et parfois un handicap durable. Dans notre organisme, certaines cellules du système immunitaire jouent un rôle essentiel pour limiter ces réactions excessives. Parmi elles, les cellules immunitaires régulatrices agissent comme des « freins » du système immunitaire. Elles permettent de contrôler l’inflammation et d’éviter que l’organisme ne s’attaque à lui-même. Des recherches récentes suggèrent que ces cellules peuvent aussi s’adapter aux différents tissus du corps et participer non seulement au contrôle de l’inflammation mais aussi à la réparation des tissus endommagés. Cependant, on comprend encore mal comment ces cellules fonctionnent dans les situations d’inflammation chronique. L’objectif de ce projet est de mieux comprendre comment ces cellules fonctionnent dans les maladies auto-immunes. Nous chercherons notamment à déterminer comment certaines voies de signalisation biologiques influencent leur capacité à contrôler l’inflammation et à favoriser la réparation des tissus. Ce projet repose sur des modèles murins génétiquement modifiés, qui permettent d’étudier précisément le rôle de certains gènes impliqués dans la régulation du système immunitaire. Les souris constituent aujourd’hui un modèle essentiel pour comprendre les interactions complexes entre les cellules immunitaires et les différents organes du corps, ce qui ne peut pas être reproduit uniquement avec des cellules cultivées en laboratoire. Les résultats de ce projet permettront de mieux comprendre les mécanismes à l’origine des maladies inflammatoires chroniques et pourraient, à plus long terme, contribuer au développement de nouvelles stratégies thérapeutiques visant à restaurer l’équilibre du système immunitaire.

Bénéfices attendus

Les résultats de ce projet permettront de mieux comprendre comment le système immunitaire fonctionne dans certaines maladies auto-immunes chroniques, comme la sclérose en plaques. En identifiant plus précisément les mécanismes responsables de l’inflammation et du dérèglement du système immunitaire, ces travaux pourraient aider à développer, à long terme, de nouveaux traitements plus ciblés et plus efficaces pour les patients. Ce projet contribuera également à améliorer les modèles expérimentaux utilisés en recherche. Une meilleure connaissance de ces modèles permettra d’optimiser les expériences, de réduire le nombre d’animaux nécessaires et d’améliorer leurs conditions d’utilisation, tout en obtenant des résultats scientifiques plus fiables. Les premiers résultats seront disponibles à court et moyen terme sous forme de publications scientifiques et permettront d’identifier de nouvelles pistes de recherche. À plus long terme, ces découvertes pourraient contribuer au développement de nouvelles approches thérapeutiques. Les connaissances acquises pourront être utilisées par des chercheurs en France et à l’international pour mieux comprendre ces maladies et améliorer les stratégies de traitement.

Procédures

Dans ce projet, les souris seront utilisées pour mieux comprendre certaines maladies inflammatoires et auto-immunes. Les animaux pourront recevoir des injections afin d'induire expérimentalement une forme contrôlée de maladie reproduisant certains aspects de l'inflammation du système nerveux observée chez l'être humain. L'évolution de la maladie est ensuite suivie pendant une durée maximale de 30 jours, par une observation quotidienne et une évaluation de l'état de santé général de chaque animal. Certains animaux recevront des substances destinées à modifier la réponse du système immunitaire, administrées par injection au maximum deux fois par semaine, ou par l'eau de boisson pendant une période de deux semaines. Ces animaux sont surveillés quotidiennement. Un second groupe d'animaux sera suivi sur une durée plus longue, jusqu'à l'âge de dix-huit mois, afin d'étudier l'effet du vieillissement sur le système immunitaire. Ces animaux recevront une injection hebdomadaire à partir de six mois, feront l'objet d'un prélèvement de sang et de selles une fois par mois, et participeront à plusieurs tests comportementaux, réalisés sur animal éveillé après une période d'habituation, à raison de trois tests par semaine au maximum et de quelques minutes chacun. À la fin des expériences, les animaux sont mis à mort selon des méthodes réglementées afin de permettre l'analyse des organes.

Impact sur les animaux

Les souris reçoivent sous la peau du dos une injection d'une substance qui stimule le système immunitaire, ce qui entraîne un stress et une douleur légers de courte durée. Cette injection provoque fréquemment une réaction locale au point de piqûre (rougeur, gonflement, plus rarement une croûte ou une petite plaie) responsable d'un inconfort léger à modéré pouvant persister plusieurs semaines. Injections dans l'abdomen, jusqu'à deux fois par semaine pendant un mois pour certains groupes, ou une fois par semaine pendant douze mois pour les animaux suivis au long cours : stress léger et douleur légère de très courte durée à chaque injection. Les souris développent ensuite une maladie inflammatoire du système nerveux qui ressemble à la sclérose en plaques humaine. Les premiers signes apparaissent une dizaine de jours après l'injection : les animaux perdent du poids, leur queue perd son tonus, puis leurs pattes arrière s'affaiblissent progressivement et peuvent devenir paralysées. Les souris se déplacent alors difficilement et peuvent avoir du mal à atteindre leur nourriture et leur eau, qui sont pour cette raison déposées au sol. Cette phase représente une nuisance modérée d'une durée de quelques jours à deux semaines. Aucun médicament contre la douleur ou contre l'inflammation ne peut être administré à ces animaux : ces traitements agiraient directement sur la réponse immunitaire qui fait l'objet de l'étude et rendraient les résultats ininterprétables. Le bien-être des animaux repose donc sur une surveillance quotidienne et sur des limites strictes, appliquées sans délai : dès qu'une souris présente une paralysie de ses deux pattes avant et arrière, une perte de poids importante ou qu'elle ne peut plus se nourrir ni boire seule, elle est mise à mort. Les souris seront maintenues jusqu'à l'âge de dix-huit mois, ceci peut induire l’apparition possible de troubles liés à l'âge (tumeurs, lésions de la peau, perte de poids, baisse d'activité), sans lien avec les interventions expérimentales. En parallèle, des tests comportementaux sont également réalisés, après une période d'habituation destinée à limiter le stress, qui reste léger et de courte durée. Des prélèvements mensuels d'une petite quantité de sang et recueil de selles induiront un stress léger et une douleur brève.

Devenir

À la fin des expériences, les souris seront mises à mort selon des méthodes réglementaires et réalisées par du personnel formé, afin de garantir une procédure rapide et de limiter toute souffrance. Cette étape nous permettra de prélever différents organes et tissus nécessaires à l’analyse scientifique. Les échantillons seront ensuite étudiés grâce à plusieurs types d’analyses complémentaires : des analyses immunologiques pour mieux comprendre le fonctionnement des cellules du système immunitaire, des analyses histologiques pour observer les tissus au microscope et évaluer les éventuels signes d’inflammation ou de lésions. Ces différentes approches permettront d’obtenir une vision détaillée des mécanismes impliqués dans les maladies étudiées et d’identifier de nouvelles pistes pour améliorer leur compréhension et, à terme, leur traitement.

Remplacement

Aujourd’hui, certaines méthodes réalisées en laboratoire, comme les cultures de cellules ou les organoïdes, permettent d’étudier certains aspects des maladies auto-immunes. Ces approches ont déjà permis d’observer comment certaines cellules réagissent à différentes stimulations et d’identifier des modifications moléculaires importantes. Cependant, ces systèmes restent limités, car ils ne reproduisent pas toute la complexité d’un organisme vivant. Des maladies comme la sclérose en plaques expérimentale impliquent en effet de nombreuses interactions entre différentes cellules du système immunitaire et plusieurs organes du corps, comme le cerveau. Pour comprendre pleinement comment ces maladies apparaissent et évoluent, il est nécessaire d’étudier ces interactions dans un organisme entier où tous les systèmes biologiques fonctionnent ensemble. L’utilisation de modèles chez la souris nous permet d’observer le développement et la progression de ces maladies dans des conditions proches de celles d’un organisme vivant. Cela permet également d’étudier le rôle de certaines cellules du système immunitaire et d’évaluer l’effet de modifications génétiques ou de nouvelles approches thérapeutiques sur l’ensemble de l’organisme. Ces modèles sont donc indispensables pour mieux comprendre les mécanismes des maladies et préparer le développement de futurs traitements.

Réduction

Pour garantir des résultats scientifiques fiables tout en utilisant le moins d’animaux possible, le nombre de souris utilisées dans chaque groupe est déterminé à l’avance grâce à des méthodes statistiques. Ces calculs permettent d’estimer le nombre minimal d’animaux nécessaire pour détecter de véritables différences entre les groupes étudiés. Dans ce projet, ces analyses montrent que 11 à 20 souris par groupe sont nécessaires pour obtenir des résultats solides et interprétables. Cette approche permet d’éviter l’utilisation d’un nombre excessif d’animaux tout en assurant la qualité scientifique des expériences

Raffinement

Pour faciliter leur alimentation et leur hydratation, des sources d’eau sous forme de gel seront mises à disposition dans les cages, et de la nourriture sera placée directement au sol pour qu’elle reste facilement accessible. Si certains animaux développent des signes de maladie plus marqués, des mesures supplémentaires seront mises en place, comme l’ajout d’une bouteille d’eau supplémentaire et d’aliments adaptés, afin de leur permettre de boire et de se nourrir plus facilement. Ces dispositions visent à améliorer leur confort et leur bien-être tout au long de l’expérience. Une grille de scoring du bien-être animal (BEA) servira de support pour identifier les effets sur le BEA. D’après cette évaluation, des mesures spécifiques seront mises en place afin de minimiser les nuisances observées, notamment : - Augmentation de la fréquence de surveillance clinique ; - Mise à disposition de nourriture et d’eau facilement accessibles (hydrogel, nourriture humidifiée ou déposée au sol) ; - Ajout de matériaux favorisant le maintien de la température corporelle en cas de diminution de la mobilité ; - Limitation des manipulations au strict nécessaire afin de réduire le stress ; - Hébergement adapté avec surveillance renforcée ou séparation temporaire si les interactions sociales compromettent le bien-être de l’animal ; - Consultation de la structure chargée du bien-être animal (SBEA) et/ou du vétérinaire et mise en œuvre d'une mise à mort anticipée (si perte de poids importante, incapacité à s’alimenter ou à s’abreuver ou signes de souffrance persistante). Un arbre décisionnel définit, pour chaque niveau de score, les mesures à mettre en œuvre : renforcement de la surveillance, adaptation de l'hébergement et de l'accès à l'alimentation, consultation du vétérinaire, puis mise à mort anticipée lorsque les critères d'arrêt sont atteints. Ces critères d'arrêt sont fixés à l'avance, identiques pour tous les animaux, et leur application ne dépend pas de l'avancement de l'expérience.

Choix des espèces

L’utilisation de souris comme modèle animal est particulièrement pertinente pour l’étude des maladies auto-immunes telles que la sclérose en plaques, car elles permettent de reconstituer de manière fidèle les interactions complexes entre les cellules immunitaires et les tissus cibles dans un organisme complet. Les souris offrent également la possibilité de manipulations génétiques précises, telles que la délétion ou la mutation de gènes spécifiques dans des populations cellulaires définies, ce qui est essentiel pour comprendre le rôle de molécules spécifiques dans la régulation immunitaire. Enfin, ces modèles permettent de suivre la progression de la maladie, la sévérité des symptômes et la réponse aux interventions thérapeutiques dans des conditions physiologiques, ce qui serait impossible à reproduire in vitro ou sur des organoïdes, garantissant ainsi la pertinence des résultats. Les animaux sont utilisés au stade adulte. Pour l'étude de la maladie inflammatoire, il s'agit de jeunes adultes âgés de deux à trois mois, âge auquel la réponse immunitaire est pleinement mature et pour lequel nos données préliminaires ont été obtenues, ce qui garantit la cohérence des comparaisons. Pour l'étude du vieillissement, les animaux sont suivis de six à dix-huit mois, ce qui correspond au passage de l'âge adulte à l'âge avancé chez la souris et permet d'observer les modifications progressives du système immunitaire. Aucun animal n'est utilisé au stade fœtal, néonatal ou juvénile.

Certaines rendues immunodéficientes par traitement, des souris sont vaccinées puis exposées sous anesthésie aux piqûres de plusieurs moustiques porteurs du virus du Nil occidental. 1 540 souris vont être utilisées, toutes tuées à l'issue, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance modéré à sévère. Le projet doit soutenir une demande d'essais cliniques pour un vaccin candidat, avant de nouveaux essais sur des "animaux plus grands", selon le porteur. Il résume les effets de l'infection en une ligne, "Troubles liés à l'infection par le virus", sans dire quels symptômes justifient la classe sévère ni à quels seuils les souris sont mises à mort.

Objectifs

Le projet de recherche permettra de soutenir une demande d’essais cliniques pour un candidat vaccin contre le virus du Nil Occidental. C'est un virus transmis par les moustiques. Il circule surtout chez les oiseaux, qui servent de réservoir naturel. Chez l’être humain, la plupart des infections ne provoquent aucun symptôme (environ 80 % des cas). Cependant, environ 20 % des personnes peuvent avoir de la fièvre et se sentir mal pendant quelques jours. Dans moins de 1 % des cas, le virus peut toucher le système nerveux et provoquer des complications plus graves, comme des inflammations du cerveau ou des méninges, voire une paralysie soudaine ou encore la mort. Ces formes graves sont plus fréquentes chez les personnes âgées ou dont le système immunitaire est affaibli. Il est présent dans de nombreuses régions du monde dont l’Europe. Il n’existe actuellement pas de vaccin contre cette maladie et le vaccin candidat que nous proposons pourra répondre à un besoin en santé publique mondiale. Le projet se déroulera dans 2 EU.

Bénéfices attendus

Le bénéfice à court terme est la compréhension des mécanismes cellulaires de protection du vaccin candidat. A long terme, les résultats soutiendront le développement d’un vaccin contre ce virus transmis par les moustiques. Le vaccin qui découlera de ce projet a le potentiel de sauver la vie de milliers de personnes chaque année et d’atténuer le fardeau sanitaire, social et économique de cette maladie transmise par les moustiques.

Procédures

Dans un premier temps, nous optimiserons les conditions pour explorer les mécanismes de l’immunité responsable de la protection vaccinale. Des prélèvements seront effectués pour permettre l’analyse de la réponse immunitaire et des acteurs impliqués. Nous évaluerons ensuite l’effet des facteurs immunitaires sur la protection conférée par le vaccin. Des souris avec les mêmes types de déficiences immunitaires que précédemment seront injectées avec le vaccin, puis exposées à la piqûre de moustiques infectés par le virus. Dans l’EU2 seront réalisés les protocoles de vaccination, d’injection des traitements et les prélèvements. Dans l’EU1 seront réalisées les protocoles d’infection par piqûre de moustique et toutes les procédures sur des animaux infectés.

Impact sur les animaux

Douleur passagère au niveau du site d’injection des traitements altérant l’immunité cellulaire, du candidat vaccin et de l’anesthésique. Douleurs légères au point des prélèvements sanguins. La piqûre de moustique se fera sous anesthésie donc sans douleur. Une faible irritation peut être attendue aux points de piqûres des moustiques. Troubles liés à l’infection par le virus. Les souris seront surveillées quotidiennement pour évaluer leurs éventuels symptômes.

Devenir

Les animaux utilisés pour l'étude de la localisation des cellules immunitaires seront euthanasiés afin de permettre la collecte de leur peau et de leurs ganglions lymphatiques. Tous les animaux infectés seront euthanasiés à la fin des procédures, conformément à l’obligation légale.

Remplacement

Dans notre cas, le modèle animal est incontournable. A ce jour, aucun modèle autre que le modèle animal ne permet d’évaluer la réponse immunitaire à un vaccin et la protection contre une infection par exposition à une piqûre de moustique infecté. Néanmoins, nous avons généré les données préliminaires nécessaires pour supporter notre hypothèse sur des modèles cellulaires. Ces travaux antérieurs nous on permit d’identifier notre vaccin candidat.

Réduction

Afin de réduire le nombre de souris, nous avons calculé le nombre limite nécessaire pour obtenir des résultats significatifs. Des travaux préliminaires ont été réalisés pour calculer ce nombre au plus juste. De plus, nous effectuerons les expériences suivant un arbre décisionnel qui validera ou non la poursuite des expériences à chaque étape pour limiter le nombre de souris utilisé.

Raffinement

Les souris auront un temps d’acclimatation (7 jours) avec visite quotidienne pour limiter le stress lié à la manipulation. Les souris seront hébergées de 3 à 5 individus/cage avec de la litière et des enrichissements variés, tels que des tunnels en carton, des abris en carton et en bois, des copeaux de carton pour fabriquer un nid et du carton rigide à ronger. Elles seront anesthésiées durant l’exposition aux moustiques pour limiter la gêne de la piqûre. Une grille de score évaluant l'état général des souris sera quotidiennement suivie. Cette grille permet d’observer différents signes de bien-être ou de malaise (comme l’apparence, l’activité, le comportement ou la perte de poids). Nous avons défini des seuils à ne pas dépasser pour garantir la santé et le bien-être des animaux. Si l’un de ces seuils est atteint, l’expérience sera immédiatement arrêtée afin d’éviter toute souffrance inutile.

Choix des espèces

Nous allons utiliser des souris avec lesquelles nous avons développé et évalué la stratégie vaccinale. Nous continuerons à documenter la protection conférée par notre vaccin candidat sur souris avant de tester le vaccin candidat sur des animaux plus grands pour soutenir une demande d’essais cliniques. Nous allons utiliser des souris adultes de 6-8 semaines car elles ont un système immunitaire mature permettant une réponse immunitaire adéquate. Leur taille permet aussi la piqûre simultanée par plusieurs moustiques, nécessaire pour maximiser l’effet de l’infection.

Injectés d'un produit qui déclenche une inflammation du muscle cardiaque, 130 rats vont être utilisés dans des procédures impliquant un niveau de souffrance modéré à sévère, tous tués à l'issue pour l'analyse de leur cœur. Pendant 35 jours, ils reçoivent quatre injections d'un anticorps anti-interleukine 6, jusqu'à six prises de sang, trois échocardiographies et deux IRM avec pose de cathéter sous anesthésie profonde, dans un second établissement rejoint par les souterrains. L'objectif est de tester cet anticorps contre la myocardite, pour laquelle il n'existe pas encore de traitement spécifique selon le porteur. Il décrit une "légère douleur de courte durée" à l'injection, tout en signalant une insuffisance cardiaque possible dans de rares cas et une mortalité liée à l'induction, que l'emploi d'une demi-dose doit réduire.

Objectifs

La myocardite est une inflammation du tissu musculaire du cœur, le myocarde, qui affaiblit la fonction de contraction de cœur. Elle représente ainsi la 3ème cause de mort cardiaque subite chez le jeune. L’analyse d’un prélèvement du myocarde pour effectuer le diagnostic tend à être remplacée de nos jours par l’imagerie moins invasive. Pour l’instant, il n’existe pas de traitement spécifique de la myocardite. Récemment, l’interleukine 6, un médiateur pro-inflammatoire, apparaît comme une cible intéressante. Objectifs concrets : Nous souhaitons déterminer l’effet d’un traitement visant à inhiber l’interleukine 6 sanguine sur l’inflammation au niveau sanguin et au niveau du myocarde chez des animaux souffrant de myocardite. Ce projet sera réalisé au sein de deux établissements (EU1 et EU2)

Bénéfices attendus

Nos résultats permettront d’identifier le mode d’action du traitement inhibiteur de l’interleukine 6 au cours de la myocardite, afin d’envisager un traitement thérapeutique chez le patient souffrant de myocardite.

Procédures

Les animaux seront soumis aux interventions suivantes sur une durée de 35 jours : Mise en place d'un modèle de myocardite par injection unique d’un produit induisant l’inflammation, sous anesthésie (durée inférieure à 10min), EU1 Traitement anti-inflammatoire hebdomadaire par injection sous-cutanée ou intraveineuse (Durée par injection : environ 3min) 4 injections sur 4 semaines, EU1 Pesée tous les deux jours (durée : inférieure à 2 min) pendant 4 semaines, EU1 Prélèvements sanguins : maximum 6 prélèvements sur 6 semaines (Durée environ 1mn par prélèvement) EU1 Pose d’un cathéter sous anesthésie profonde (durée : environ 15min) suivie d’une imagerie IRM avec injection de produit de contraste (durée : environ 1h) au 14ème, 28ème jour EU2 Echocardiographies sous anesthésie profonde (durée : 20min) au premier jour, 21ème et 35ème jour EU1

Impact sur les animaux

Le modèle de myocardite auto-immune par immunisation peut induire une légère douleur de courte durée au moment de l’injection du produit induisant l’inflammation au niveau de la patte des animaux. Ce modèle induit une dysfonction du cœur dû au développement de la pathologie, pouvant mener à une fatigue et un essoufflement à l’effort, et dans de rares cas à une insuffisance cardiaque. Lors des protocoles d’imagerie non invasive, un léger inconfort/stress de courte durée peut apparaitre à l’induction de l’anesthésie et au réveil ; de même qu’un stress léger de courte durée lors des manipulations/contentions. Les injections peuvent entrainer une légère douleur de courte durée au point d’injection. Si le traitement par l’anticorps anti IL6 est efficace, nous nous attendons à ce que les animaux appartenant au groupe traité présentent une amélioration notable de leur état évalué par une réduction des marqueurs inflammatoires, une amélioration des paramètres fonctionnels et par conséquent, une potentielle réduction de la mortalité dans ce groupe expérimental.Ce qui pourrait se traduire par une gravité moindre.

Devenir

Les animaux seront mis à mort afin de récupérer et analyser les différents organes d'intérêt (cœur en particulier), permettant ainsi de confirmer et compléter les résultats obtenus in vivo (imagerie) en identifiant les mécanismes impliqués.

Remplacement

L’utilisation d’animaux vivants est justifiée notamment par le rôle central de l’imagerie in vivo dans la caractérisation du modèle de myocardite et de l’imagerie de l’inflammation pour le diagnostic. Le mécanisme d’action de l’anti IL-6 au niveau de l’organisme entier n’est actuellement pas reproductible in vitro ou ex vivo. En effet, il n’existe pas de modèles cellulaires ou ex vivo d’un modèle de myocardite autoimmune dans la littérature actuellement. De plus , une approche in vitro ou ex vivo ne tiendrait pas compte de l’effet sytémique de IL6 que nous voulons explorer dans cette étude car nous nous intéressons à son rôle dans la circulation sanguine et le mécanisme d’action de l’interleukine 6 requiert la communication entre les organes impliqués dans l’inflammation et le cœur.

Réduction

Le nombre d’animaux par procédure a été calculé à l’aide d’un logiciel de statistiques afin de déterminer le plus précisément possible le nombre minimal d'animaux permettant d'obtenir des résultats statistiquement exploitables, soit au maximum 130 animaux sur 4ans. Le suivi longitudinal par imagerie évite de mettre à mort des animaux à chaque point temporel d’intérêt pour récolter les informations.

Raffinement

Les animaux auront un temps d'acclimatation et un enrichissement de leur milieu. Une attention particulière sera accordée à l'évolution de la masse corporelle afin de vérifier que les animaux s'alimentent correctement. La douleur des animaux sera réduite au minimum en veillant à couvrir les différents temps d'études par une analgésie. Les prélèvements sanguins ont été mutualisés avec les examens d’imagerie pour limiter le nombre d’anesthésie et utiliser la même voie que le cathéter utilisé pour l’injection du produit de contraste lors de l’imagerie. Suite à notre expérience dans une précédente étude, l’induction de la myocardite a été raffinée par l’utilisation d’une demi-dose de la solution d’immunisation, diminuant ainsi l’altération cardiaque et la mortalité, et se rapprochant de la majorité des patients myocardite à traiter. L’un des objectifs du projet est également de valider un mode d’injection moins invasif (sous cutanée). Différents point limites ont été définis afin de ne pas poursuivre l'étude si les animaux présentent des signes de souffrance ou de douleur. Plus précisément, l’ensemble des procédures auront lieu dans l’EU1, sauf l’imagerie IRM dans l’EU2. Le transport des animaux sera assuré dans une cage de transport dédiée, et nécessite moins de 5min de marche porte à porte par les souterrains de nos bâtiments (à température ambiante).

Choix des espèces

Le rat est l'espèce animale la plus utilisée dans ce modèle de myocardite expérimentale auto-immune et parmi les espèces animales, celle qui a été la plus étudiée dans le domaine des pathologies inflammatoires. L’anatomie et la physiologie de la circulation sanguine du rat sont également bien connues et sont semblables par leurs grands traits à celles de l’Homme. L’ensemble des connaissances et des acquis dont nous disposons au laboratoire et dans la littérature rend cette espèce particulièrement pertinente pour étudier les pathologies inflammatoires.