Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 11/01/2024
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-233949)
72 rates gestantes ou allaitantes vont être utilisées, toutes tuées à l’issue pour prélèvement d’organes, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance modéré. Elles reçoivent un cocktail de polyphénols par gavage puis subissent quatre prélèvements de lait sous anesthésie, afin de mesurer le passage des composés dans le sang, le cerveau, le foie et les urines. L’objectif, présenté comme une étape vers un complément alimentaire destiné à la femme enceinte, prolonge des travaux antérieurs sur la neuroprotection de ratons soumis à une hypoxie-ischémie. Le porteur affirme que l’évaluation du métabolisme « nécessite une approche intégrative » sans remplacement disponible.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Les précédents travaux de l’équipe ont montré un rôle neuroprotecteur d’une supplémentation maternelle en polyphénols, dans le cadre de l’hypoxie-ischémie néonatale. L’administration orale de polyphénols chez des femelles Wistar gestantes ou allaitantes a induit une neuroprotection des ratons ayant subi une hypoxie-ischémie néonatale (modèle Rice-Vannucci). L’effet préventif des polyphénols s’est illustré par (i) une diminution des volumes lésionnels cérébraux, mesurée par IRM ainsi que par une préservation des aptitudes sensori-motrices des ratons mise en évidence par des tests comportementaux. Les doses utilisées étaient nutritionnelles, rendant impossible le suivi des polyphénols chez les mères de même que chez les ratons (doses inférieures au seuil de détectabilité). Afin d’attribuer les effets bénéfiques à un composé phénolique ou à un de ses métabolites et d’évaluer la capacité des polyphénols/métabolites à franchir les différentes barrières biologiques (placenta, barrière hémato-encéphalique), l’objectif du projet sera de mesurer dans différents tissus (urines, sang, cerveau, foie), les concentrations de polyphénols ainsi que de leurs métabolites, chez les mères ainsi que chez les ratons.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Les bénéfices attendus de ce projet sont une compréhension de la biodisponibilité et du métabolisme d’un cocktail naturel de polyphénols (extraits à partir du fruit de la passion), tant chez la rate gestante allaitante que chez les ratons (fœtus et nouveau-nés). Cela pourrait faire la lumière sur les effets bioactifs de ces molécules, ainsi que sur certains mécanismes d’action potentiels. Ce travail pourra participer à la mise sur le marché d’un complément alimentaire à destination de la femme enceinte.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Les animaux seront soumis à : – un gavage. Fréquence : 1 fois. Durée : quelques secondes – prélèvements de lait. Fréquence : 4 fois. Durée : 10 min. – prélèvement d’organes après mise à mort. Fréquence : 1 fois.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Le gavage nécessaire à l’administration du cocktail polyphénolique pourra entraîner un stress des femelles. Les prélèvements de lait pourraient entraîner un inconfort et un stress. Ces prélèvements seront réalisés sur des animaux anesthésiés. L’anesthésie pourrait entraîner un changement du rythme cardiaque et/ou respiratoire, mesurés grâce à un capteur placé sous l’animal.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Tous les animaux seront mis à mort afin d’effectuer les prélèvements d’organes nécessaires aux dosages permettant de quantifier les polyphénols ainsi que leurs métabolites.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Le but final du projet est d’évaluer la biodisponibilité d’un cocktail polyphénolique ayant montré, in vivo, une neuroprotection d’une supplémentation maternelle dans le cadre d’une hypoxie-ischémie néonatale. L’évaluation du devenir du cocktail et de son métabolisme nécessite une approche intégrative, il n’existe pas de remplacement disponible à notre modèle expérimental.
2. Réduction
Les dosages polyphénoliques seront réalisés sur un nombre minimum d’animaux permettant de réduire les erreurs standard à la moyenne intergroupe sous les 5%..
3. Raffinement
Pour le gavage, les rates seront conditionnées à la contention un à deux jours avant la procédure. Le gavage est une procédure délicate, il sera réalisé par un expérimentateur expérimenté. Une canule à bout rond en plastique à usage unique sera utilisée afin de limiter les risques de blessure pour l’animal (perforation du tube digestif). Le volume administré, à température ambiante sera inférieur à 10 ml/kg. En l’absence de détresse respiratoire et de reflux, l’animal sera remis à sa cage. Dans l’heure qui suit, les signes cliniques de l’animal suite à l’exécution d’un gavage seront surveillés (détresse respiratoire, muqueuse pâle, isolement). Au niveau de l’hébergement, les animaux seront en cage (mère + portée), sur une litière de peuplier, caractérisée par un fort pouvoir absorbant et une granulométrie adaptée. L’hébergement sera enrichi avec un nid végétal, du coton et un tunnel en carton. Les animaux seront observés de façon journalière par le zootechnicien et/ou la personne en charge de l’expérimentation. Lors de ces observations, la capacité de l’animal à s’alimenter, le comportement et sa vivacité, la couleur de la peau ou l’état du pelage seront vérifiés. Un échange quotidien avec le zootechnicien et l’expérimentateur permettra une intervention et une prise de décision rapide en cas de souffrance constatée.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Le rat présente des avantages par rapport à la souris qui rendent le choix de l’espèce pertinent : la physiologie du rat est plus proche de celle de l’homme que ne l’est la physiologie de la souris. Ce point est important puisque ce projet devrait, en partie, mener au développement d’un complément alimentaire destiné à la femme enceinte. Les animaux seront utilisés aux stades de développement : – adulte, afin de définir la biodisponibilité chez les femelles gestantes ou allaitantes – fœtal, afin de définir la biodisponibilité chez les fœtus ainsi que la capacité des polyphénols et métabolites à traverser la barrière placentaire – nouveau-né, âgés de 8 jours, afin de définir la biodisponibilité chez les nouveau-nés et de déterminer la part de l’allaitement dans la neuroprotection.