Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 2024-09-04 00:00:00
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-439141)
Une souris femelle par étudiant, deux mâles par groupe de seize : ce travail pratique d’enseignement supérieur consiste à tuer les animaux pour récupérer leurs gamètes et réaliser une fécondation in vitro observée au microscope. 270 souris vont être utilisées sur la durée du projet, toutes tuées, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance léger. Les femelles, âgées de quatre semaines et non pubères, reçoivent deux injections hormonales à 48 heures d’intervalle pour déclencher une ovulation abondante. Le porteur écrit que ces injections se font sans protocole d’analgésie parce qu’il accroîtrait le stress de la contention, et justifie l’effectif par le faible taux de réussite des étudiants, quatre à six embryons obtenus sur soixante à quatre-vingts ovocytes.
Résumé produit par un modèle de langage à partir du seul texte du laboratoire, selon une méthode arrêtée par l’OXA. Publié sans relecture individuelle préalable, sous la responsabilité de l’association, et corrigé au fil des relectures.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
Décrire les objectifs du projet.
Note de l'OXA. Cette question est celle du formulaire européen de résumé non technique. Elle est posée au laboratoire qui demande l'autorisation, et sa réponse est écrite avant que la première procédure commence (arrêté du 1er février 2013, art. 5). Ces objectifs servent à justifier l'utilisation des animaux devant le comité d'éthique. Aucun document public ne dira ensuite s'ils ont été atteints : la directive permet aux États de faire mettre à jour le résumé avec les résultats de l'appréciation rétrospective (directive 2010/63/UE, art. 43), la base européenne prévoit de les recevoir, et aucune entrée française n'en porte (base ALURES).
Dans quel but fait-on ça ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Le but de ce TP est de réaliser et observer les étapes de fécondation in vitro chez la souris et d’évaluer l’impact du fond génétique sur le nombre d’ovocytes collectés et la qualité de la fécondation. Le TP comprendra une étape pratique (mise à mort des animaux, collecte des gamètes et fécondation in vitro) et une étape d’observation sous microscope. Pour l’étape pratique : 1 souris femelle par étudiant sera utilisée et 2 mâles seront utilisés pour l’ensemble du groupe de TP (soit 16 étudiants). Seul le prélèvement des gamètes mâles et femelles nécessite la manipulation d’animaux. C’est pourquoi les étapes du TP qui suivent la collecte des gamètes ne seront pas mentionnées. Ainsi, dans ce projet, seules seront mentionnés les procédures : i- d’hyperstimulation ovariennes (sur souris femelles) et, ii- de mise à mort des souris mâles et femelles pour la collecte des gamètes mâles et femelles. Aucune manipulation autre que les injections d’hormones et mise à mort ne sera réalisée sur les souris.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Note de l'OXA. Le formulaire européen demande les bénéfices « susceptibles de découler » du projet. Il appelle donc une projection, et il l'obtient : ce que le laboratoire écrit ici est ce qu'il espère, avant d'avoir commencé. Deux chercheuses ont repris six corpus d'études précliniques déjà menées et pesé les dommages réellement infligés aux animaux contre les bénéfices cliniques réellement obtenus : moins de 7 % de ces études ressortaient défendables (Pound et Nicol, 2018).
Est-ce « inutile » ou « nécessaire » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
La fécondation in vitro chez la souris est une pratique courante de laboratoire. Pour cette raison, les étudiants doivent mettre en pratique cette technique pour être confronté aux problèmes et limites de celle-ci. De plus, les étapes qui caractérisent la fécondation et les premiers stades de développement embryonnaires sont très proches de ce qui est observé chez l’Homme. A ce titre, il apparaît important d’un point de vue pédagogique que l’étudiant puisse être confronté pratiquement à ce mécanisme cellulaire.
Nuisances prévues, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Note de l'OXA. La formule « en règle générale » autorise une réponse générale, et c'est l'un des points sur lesquels les examens de qualité trouvent ces documents défaillants. Un examen publié en 2018 a établi que les résumés allemands et britanniques décrivaient mal ce qui est fait aux animaux et ce que ceux-ci pourraient éprouver (Taylor et al., 2018). L'adoption d'un modèle commun européen a nettement amélioré le premier point, à peine le second (Taylor et al., 2024).
Le droit d'accès aux documents · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Pour induire l’ovulation et permettre la collecte en nombre suffisant d’ovocytes, les souris femelles reçevront deux injections d’hormones à 48 heures d’intervalle. L’injection se fera par voie intra péritonéales et durera 10 secondes (préhension plus injection)
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Note de l'OXA. C'est l'endroit du document où les animaux devraient apparaître, et c'est celui qui résiste. Un nouvel examen, publié en 2024, a mesuré que cinq des six éléments attendus sur les dommages prévus progressaient depuis l'adoption d'un modèle commun européen. Les effets indésirables sont le sixième : 41 % des résumés allemands et 48 % des britanniques les décrivent complètement. Les auteurs relèvent aussi des effets présentés comme minimes sur des projets classés modérés ou sévères (Taylor et al., 2024). Ces mesures portent sur l'Allemagne et le Royaume-Uni. L'examen de 2018 classait la France parmi les pays les moins bons pour l'identification, l'accessibilité et la qualité de ses résumés, sans les noter rubrique par rubrique (Taylor et al., 2018). Les résumés français suivent aujourd'hui le modèle européen commun.
Les animaux souffrent-ils ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Aucune nuisance connue de l’injection des hormones, hormis le stress et la douleur Induite par la contention et l’injection. Toutefois, si des signes de douleurs précoces sont observés (prostration ou vocalises, absence de recherche de contact avec ces congénères…) et qui pourrait être lié à une injection ectopique, l’animal sera immédiatement euthanasié.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Note de l'OXA. Le formulaire demande de justifier ce sort, non de le décrire. L'analyse dommage-avantage que la directive impose au comité d'éthique porte sur « la souffrance, la douleur et l'angoisse » infligées aux animaux (directive 2010/63/UE, art. 38). Quand ce sort est la mise à mort, celle-ci ne figure donc pas parmi les dommages que le comité met en balance avec les bénéfices annoncés. L'OXA écrit « mise à mort » plutôt que « sacrifice », qui emprunte au registre du don consenti, ou « euthanasie », qui désigne une mort décidée dans l'intérêt de celui qui meurt.
Peut-on parler d'éthique en expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
La découverte des appareils reproducteurs mâles et femelles chez la souris ainsi que la collecte des gamètes mâles et femelles nécessite la mort de l’animal.
Application de la règle des "3R", selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
1. Remplacement
Note de l'OXA. La directive demande au résumé « une démonstration de la conformité » aux exigences de remplacement, de réduction et de raffinement (directive 2010/63/UE, art. 43). C'est donc le demandeur qui démontre sa propre conformité, dans le document même qui sollicite l'autorisation. Cette démonstration peut prendre la forme d'une affirmation qu'aucune méthode de substitution n'existe, que le document n'a pas à sourcer. Ces trois exigences sont par ailleurs subordonnées à l'objectif du projet : elles cherchent à remplacer les animaux dans un projet donné, elles n'interrogent pas ce projet.
Comment avancer vers la fin de l'expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Il n’existe pas de méthodes alternatives ne nécessitant pas l’animal pour réaliser une fécondation in vitro chez les Mammifères. Le choix du modèle murin s’impose pour deux raisons: c’est le modèle le plus proche et accessible pour reproduire une fécondation in vitro proche de l’Humain en terme biologique et, d’autre part, il permet de confronter des étudiants se spécialisant en Reproduction Mammalienne de pouvoir réaliser des prélèvements des gamètes mâles et femelles in vivo.
2. Réduction
Note de l'OXA. La réduction dont il est question ici porte sur le nombre d'animaux par groupe expérimental, calculé pour que l'analyse statistique tienne. Le total annoncé dans la fiche est une estimation portant sur une autorisation de cinq ans au maximum (code rural, art. R214-123) : il ne dit pas combien d'animaux seront effectivement utilisés, et il ne se rapporte pas à une année.
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Pour un groupe de TP (16 étudiants), nous envisageons 16 femelles et 2 mâles. Trois groupes de TP sont prévus, correspondant à 48 femelles et 6 mâles au total par an soit 270 animaux au total sur l’ensemble du projet. – Le nombre de souris femelles est justifié par le nombre d’ovocytes collectés/femelles qui doit être suffisant pour obtenir des embryons aux premiers stades de clivage embryonnaire (ie stade 2 cellules). Sur 60-80 ovocytes collectés à partir de 8 femelles seuls 4 ou 6 atteindront le stade 2 cellules (faible taux de réussite lié au manque d’expérimentation des étudiants). Cette faible réponse devra être observée et expliquée par l’étudiant et des tests statistiques devront être réalisés pour évaluer les différences entre fonds génétiques. – Le nombre de souris mâles est justifié pour des raisons pratiques afin de collecter les spermatozoïdes de meilleure qualité en fonction du timing de collecte des ovocytes. Nous avons choisi un fond génétique de souris non consanguine pour augmenter le nombre de spermatozoïdes prélevés (10 millions de spermatozoïdes par souris en moyenne en condition TP, 200 000 spermatozoïdes sont utilisés par étudiant).
3. Raffinement
Note de l'OXA. Le raffinement nomme une amélioration technique de la procédure, sans dire ce qu'elle change pour l'animal qui la subit. La réglementation impose d'atténuer la douleur, dans une limite qu'elle inscrit elle-même : « pour autant que cela soit compatible avec la finalité de la procédure expérimentale » (code rural, art. R214-109). Ce qui reste de souffrance après cette limite est autorisé. Le raffinement ne porte par ailleurs que sur la procédure : les souffrances de la captivité elle-même, confinement, bruit, lumière, manipulations d'entretien, ne relèvent d'aucun des trois R.
La réglementation est-elle « très stricte » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les injections à 48 heures d’intervalle d’HCG et de PMSG peuvent conduire à un stress lié à la préhension et la contention de l’animal plus qu’à la douleur induite par l’injection. Pour ces raisons, les injections intra-péritonéales doivent être réalisées par une personne expérimentée, limitant le temps de préhension sans protocole d’analgésie/antalgie pré et post injection pouvant accroitre le stress de l’animal. Afin de limiter le stress, les animaux sont stabulés en présence d’enrichissements dans la cage (tunnel et coton). D’autre part l’animal sera surveillé par l’expérimentateur pour identifier les point-limites quotidiennement pendant 5 minutes pendant la toute durée de l’experimentation (3 jours). Cette surveillance ce fera spécifiquement dans les 5 minutes après injections les jours d’injections (Jour 0 et jour 2). Les point-limites seront identifiés par observation de l’animal et si un de ces point est caractérisé, l’animal sera euthanasié par dislocation cervicale.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Note de l'OXA. Le dossier d'autorisation demande de justifier l'origine des animaux, leur espèce, leur nombre estimé et leur stade de développement (arrêté du 1er février 2013, art. 5). La justification attendue est technique : elle porte sur l'adéquation de l'espèce à l'objectif poursuivi. Ce que l'appartenance à une espèce autorise à faire subir à un individu est une question morale, et le formulaire ne la pose pas. L'appartenance à une espèce, prise seule, ne fonde pourtant pas de différence de statut moral entre des individus également capables de souffrir.
Spécisme et expérimentation animale · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les souris sont utilisées car la technique de fécondation in vitro chez la souris est bien décrite et proche de l’Homme Souris femelles de 4 semaines. Cet âge est choisi car ce sont des souris prébubères (non reproductives) dont le stock d’ovocytes est maximal et où les follicules sont sensibles aux gonadotropines. Souris mâles de 10 semaines. Cet âge est choisi pour récupérer un nombre et une qualité maximale de spermatozoïdes.