Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 11/06/2025
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-492247)
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
L’ORFADIN est un médicament dont l’efficacité dans le traitement d’une maladie héréditaire du foie provoquée par une dégradation incomplète d’un des composants des protéines alimentaires, la tyrosine, est incontestable. Des travaux de l’équipe montrent que cette dégradation de la tyrosine est essentielle à la survie et la prolifération des cellules tumorales pancréatiques qui ont colonisées le foie. Bloquer ce processus en administrant l’ORFADIN combiné ou non à un régime alimentaire sans tyrosine est un traitement possible contre la dissémination du cancer pancréatique dans le foie. Ce projet comportera 3 objectifs : Obj. 1 : Evaluer si l’ORFADIN est plus efficace seul ou associé à un régime sans tyrosine dans le traitement des métastases du foie ; Obj. 2 : Evaluer si le traitement optimal défini dans l’obj.1 (i.e. ORFADIN*) prolonge/améliore l’effet de la chimiothérapie, le FOLFIRINOX sur les métastases du foie ; Obj. 3 : Evaluer si ces différents traitements n’ont pas des effets secondaires importants.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Cette étude confirmera l’efficacité de l’ORFADIN associé ou non au FFX dans le traitement des cancers pancréatiques avec des métastases dans le foie et déterminera si ces traitements n’engendrent pas des effets indésirables. L’utilisation de l’ORFADIN pour le traitement du cancer pancréatique avec des métastases dans le foie sera protégée par un brevet et pourra être testée chez des patients avec un cancer pancréatique métastatique, pour lesquels aucun traitement curatif est disponible.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Une seule procédure chirurgicale par souris sera effectuée, d’une durée maximale de 25 min (temps d’endormissement et de réveil inclus) : une greffe de cellules tumorales pancréatiques dans la rate qui favorisera le développement de métastases dans le foie. Une partie de ces souris seront traitées par une chimiothérapie, administrée 3 fois par semaine pendant 2 semaines (durée de l’intervention 1-2 min). A la fin de l’expérience les animaux seront euthanasiées par dislocation cervicale et autopsiées afin de collecter les organes d’intérêt : foie métastatique, pancréas, rate, poumons, ganglions lymphatiques, tissus métaboliques (rein, foie, tissu adipeux, muscle squelettique), et le sérum.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Les nuisances subies par les animaux sont : – avant la chirurgie : légère contention pour l’injection d’anti-douleur pouvant induire un léger stress ; – au cours de la chirurgie : l’anesthésie gazeuse peut engendrer une hypothermie et une détresse respiratoire si elle est mal contrôlée ; – en post-chirurgie : des complications, telles que rupture des points de sutures, infection de la plaie, peuvent survenir et engendrer de la douleur qui doit être rapidement soulagée ; un isolement temporaire de l’animal et de ses congénères ce qui génère un stress ; – au cours des traitements : les injections à répétitions de la chimiothérapie peuvent induire de légers dommages du tissu au site d’injection, les traitements combinés, eux-mêmes, peuvent avoir des effets indésirables, et les apparences/comportements anormaux induits par le développement des métastases qui sont rapidement détectés grâce à notre expertise du modèle et pris en charge selon une procédure adaptée.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Afin d’évaluer la prise métastatique au sein du foie en fonction des traitements administrés aux animaux, ceux ci seront euthanasiés par dislocation cervicale et autopsiés.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
L’utilisation d’animaux est absolument indispensable pour finaliser le projet, qui vise à supprimer le dialogue entre les cellules cancéreuses des métastases de foie et les cellules du foie avoisinantes en utilisant un médicament déjà sur le marché pour traiter une autre maladie que le cancer du pancréas. Nous évaluerons si ce médicament permet une réduction du nombre et/ou de la taille des métastases du foie, et n’induit pas d’effets secondaires importants. Nous avons déjà montré que ce médicament est capable de supprimer le dialogue entre les cellules de foie en culture avec des cellules tumorales pancréatiques, validant ainsi la pertinence d’inhiber ce dialogue entre ces deux types cellulaires pour limiter l’expansion des métastases chez l’animal. C’est cette hypothèse que nous souhaitons valider chez l’animal porteur de métastases, et traité avec la chimiothérapie utilisée chez les patients pour le traitement des cancers pancréatiques métastatiques.
2. Réduction
Le nombre d’animaux, permettant d’obtenir une réduction incontestable de la taille des métastases dans le foie des animaux traités par rapport aux animaux sans traitement, est de 13 par groupe. Il a été défini par un test statistique et l’estimation de la diminution attendue du nombre/taille des métastases, prenant en compte les différences entre individus déterminées par les données de la littérature et les résultats antérieurs de l’équipe.
3. Raffinement
Les personnes compétentes en expérimentation animale et en chirurgie réaliseront les injections d’anti-douleur, l’anesthésie gazeuse, et l’injection d’anesthésique local avant la chirurgie, la greffe de cellules tumorales pancréatiques dans la rate, la suture et l’injection d’anti-douleur après la chirurgie. Ainsi toutes complications post-opératoires seront évitées et leur expertise limite le nombre d’animaux à opérer. Un enrichissement matériel de l’environnement des animaux (cocon, nid, maisonnette, etc…) est mis en place dans toutes les cages afin que les souris expriment un répertoire diversifié de comportements normaux. Une observation quotidienne de chaque souris opérée et traitée sera effectuée et différents critères : apparences générales, comportements, etc… seront évalués selon la grille de points définie. Des mesures adéquates seront prises pour chaque comportement anormal sévère observé, pouvant aller jusqu’à l’euthanasie obligatoire de l’animal si nécessaire. L’utilisation d’anti-inflammatoires non stéroïdien pour limiter la douleur au cours des différents traitements entrepris est proscrite dans le cadre de ce protocole. En effet, les données de la littérature montrent que leur administration altère le métabolisme tumoral, limite la croissance tumorale et/ou potentialise l’action de la chimiothérapie.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Nous utiliserons des souris, modèle d’étude de référence dans le domaine du cancer pancréatique. Pour mimer un cancer pancréatique métastatique des cellules tumorales pancréatiques seront implantées dans la rate et donneront naissance après leur migration vers le foie à des métastases. Cette espèce a de nombreux avantages, notamment son développement rapide, une forte descendance et une facilité d’entretien de l’élevage. Les souris saines utilisées seront âgées de 9 semaines. A ce stade, l’impact du métabolisme sur la progression métastatique ne sera pas impacté par une prise de poids ou tout autre facteur lié au vieillissement de l’animal.