Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 08/01/2025
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-573701)
Des cellules tumorales sont implantées chirurgicalement dans le pancréas, le sein, les ovaires, le poumon, le colon ou le foie de 4 200 souris, dont les tumeurs sont ensuite suivies deux fois par semaine par imagerie sous anesthésie gazeuse. Toutes subissent des procédures impliquant un niveau de souffrance modéré, avec une injection intraveineuse par semaine pendant quarante-neuf jours et un prélèvement de sang hebdomadaire alors qu’elles sont éveillées. Le porteur annonce un acte chirurgical de cinq à dix minutes maximum par souris, puis décrit une « anesthésie longue » génératrice de douleurs après l’opération, et affirme que des tumeurs en trois dimensions et des organoïdes ont limité la phase animale « au stricte nécessaire », pour un candidat médicament testé par an. Toutes sont tuées pour que leurs organes soient analysés, ou plus tôt dès qu’un point limite est atteint.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Durant ces dernières décennies, la recherche médicale a réalisé d’importants progrès en matière de prévention et de traitements des cancers, associés à la diminution de la mortalité. Néanmoins, l’incidence des cancers et leur létalité restent élevées. Le développement de traitements anti-cancéreux reste donc primordial. L’objectif principal de ce projet est de tester les candidats médicaments (à raison de un candidat/ an) dans plusieurs modèles de cancers touchant différents organes. Cette implantation de lignées de cellules tumorales est réalisée directement dans l’organe cible permettant ainsi d’avoir une efficacité optimale grâce à un microenvironnement tumoral plus pertinent. Des administrations, des suivis tumoraux et des prélèvements divers sont réalisés sur les animaux tout au long des procédures expérimentales. Cette caractérisation préclinique orthotopique est primordiale afin d’identifier les meilleurs schémas de traitement et de préparer au mieux les futurs essais cliniques avec ces nouveaux candidats médicaments anticancer. Les études se porteront sur les cancers suivants : les cancers du pancréas, du sein, des ovaires, du poumon, du colon et du foie.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Ces études représentent une phase essentielle dans l’estimation du bénéfice/ risque des nouveaux candidats médicaments développés pour le traitement du cancer. En cas de succès, ce projet envisagera d’essayer chez l’homme de nouvelles thérapies pour guerir le cancer.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Différents protocoles expérimentaux sont réalisés faisant intervenir des gestes chirurgicaux. Ces derniers nécessitent une anesthésie générale, durée de l’acte chirurgical entre 5 et 10 minutes maximum par souris. Les injections des candidats médicaments sont administrées par voie intraveineuse (1 fois par semaine et ce pendant 49 jours) sur souris non anesthésiées (5 à 10 secondes par injection). Des prélèvements sanguins, 1 prélèvement par souris et par semaine (10 secondes par acte) sont effectués sur souris non anesthésiées. Les injections des différents traitements (les anesthésiques, les traitements de référence) se font respectivement en sous-cutanée et en intrapéritonéale (10 secondes par manipulation). L’imagerie par bioluminescence sera réalisée afin de suivre le développement tumoral, deux fois par semaine, souris sous anesthésie gazeuse, un maximum de 15 minutes d’acquisition. Le substrat de suivi de la luminescence est réalisé par voie intrapéritonéale (10 secondes par acte).
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Les animaux subissent une anesthésie longue et une procédure chirurgicale, ce qui peut induire un inconfort voire des douleurs post-opératoires. Lors du suivi de croissance tumorale par bioluminescence, les animaux seront anesthésiés 2 fois par semaine (entre le lundi et le vendredi) ce qui pourrait engendrer du stress chez les animaux et un inconfort lié à la manipulation. La présence de tumeurs au niveau des organes cibles peut induire un inconfort, une douleur chez les animaux. Les manipulations des souris, les prises de sang effectuées ainsi que les injections de traitements répétés (IP ou gavage) peuvent induire un inconfort, une angoisse et des douleurs chez celles-ci.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Tous les animaux seront mis à mort pour analyses des organes principaux.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Différentes études in vitro sur des modèles de cellules tumorales et des modèles plus « sophistiqués » comme des « avatars » de tumeurs (structures 3D et organoïdes) ont été mises en place pour permettre de bien caractériser les candidats médicaments sur des modèles pertinent et limiter ainsi la nécessité de recours à plusieurs expérimentations sur des modèles animaux in vivo. Ceci a permis de limiter cette phase in vivo au stricte nécessaire. Toutefois, l’évaluation du rapport entre la dose toxique et la dose efficace sur des tumeurs nécessite le recours à des organismes modèles de l’Homme. En effet, l’efficacité antitumorale est liée à la disponibilité de la molécule dans la tumeur.
2. Réduction
Les effectifs ont été calculés à partir d’un dimensionnement statistique adapté, que les différents groupes contrôles permettent de conclure sur les effets potentiels du traitement et que les aléas liés au modèle sont pris en compte. Le nombre de souris correspond au nombre minimal requis pour avoir une différence significative de réponse biologique entre les différents groupes.
3. Raffinement
Le bien-être des animaux est analysé et est pris en compte tout au long des protocoles expérimentaux. Les critères concernant l’apparence, la mobilité et le comportement des animaux sont détaillés. Une phase d’observation post chirurgie et un suivi quotidien post traitement des animaux sont réalisés afin d’évaluer de leur état général. Utilisation d’anesthésiques et d’analgésiques couvrant une longue période d’action (72h) ; mise en place d’une grille unique de score, description détaillée dans tous les protocoles. Suivi des animaux via une grille d’évaluation de la souffrance prenant en compte le poids, la croissance tumorale, le comportement et l’aspect de l’animal. Les animaux sont hébergés dans des cages enrichies. La détermination des points limites et l’utilisation d’une grille de score permettent de réduire, supprimer ou soulager au maximum l’inconfort, la douleur et l’angoisse subies par les animaux. Dès l’atteinte d’un point limite, les animaux sont mis à mort selon les méthodes réglementaires.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Les effectifs ont été calculés à partir d’un dimensionnement statistique adapté, les différents groupes contrôles permettent de conclure sur les effets potentiels du traitement. Les aléas liés au modèle tumoral greffé sont pris en compte. Animaux à maturité sexuelle, entre 7 et 12 semaines. Les animaux plus âgés ne sont pas souhaités dans la mesure où la présence de graisse peut entrainer une modification de la biodisponibilité de la molécule. Ces souris jeunes adultes peuvent finir leur croissance ; les animaux à cet âge supportent mieux le transport de l’élevage jusqu’à l’animalerie ainsi que l’anesthésie.