Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 10/04/2025
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-696369)
232 souris vont être utilisées, toutes tuées à l’issue, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance modéré. Des femelles gestantes reçoivent une injection de cytomégalovirus murin dans chaque poche amniotique au treizième jour de gestation, et leurs petits, nés infectés, subissent la section d’un bout de queue à la naissance, cinq jours d’injections dans l’abdomen et des mesures d’audition à trois, six et neuf semaines. Parmi les effets attendus, le porteur liste la difficulté de prise de poids, l’ouverture des cicatrices chez les mères et la surdité des souriceaux. Il affirme que l’étude ne peut être réalisée que chez l’animal, la complexité de l’oreille interne rendant selon lui impossible tout recours à des « méthodes alternatives ».
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
L’infection pendant la grossese à cytomégalovirus (un virus transmissible par voie respiratoire chez l’Homme et qui peut infecter le bébé pendant la grossesse) est la principale cause infectieuse de surdité acquise avant la naissance. Cette infection représente 0,5 à 1% des naissances vivantes et elle est le plus souvent sans symptomes à la naissance. La surdité est la séquelle la plus fréquente même chez les nouveau-nés sans symptomes à la naissance, et peut se révéler plusieurs années après. L’équivalent murin du virus, le MCMV, peut entraîner chez la souris, les mêmes anomalies que celles retrouvées chez l’humain. La surdité chez les souriceaux infectés est mise en évidence par une mesure de l’audition (potentiels évoqués auditifs (PEA)) à 3, 6 et 9 semaines. Trois nouvelles molécules semblent avoir une efficacité antivirale sans toxicité. Le but de cette étude est de comparer l’efficacité de ces molécules par rapport au traitement de référence sur un modèle murin dans le contexte d’une infection à CMV.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Il n’existe actuellement pas de traitement permettant de prévenir ou guérir la surdité dans le cadre de l’infection à cytomégalovirus (CMV) pendant la grossesse. La prescription de traitement antiviral à la naissance semble limiter ou ralentir la surdité. Les antiviraux commercialisé sont efficaces sur l’infection mais ils ont des effets secondaires (toxicité sanguine, toxicité rénale) et n’ont pas l’autorisation d’utilisation pour l’infection congénitale par le CMV. Les traitements que nous voulons tester ont été développés récemment et n’ont pas encore été testés dans les infections congénitales à CMV. Il s’agit donc de la première étude d’évaluation d’efficacité de ces antiviraux dans cette indication.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Les souris seront infectées par le cytomégalovirus murin (MCMV) puis traitées par différents antiviraux pour observer l’efficacité de ces traitements sur la surdité provoquée par le MCMV. L’infection au MCMV sera faite une fois par souris gestante, par une injection dans chaque poche amniotique (poche contenant les bébés souriceaux) de MCMV. Les traitements à l’étude seront administrés chez les souriceaux nés infectés, par une injection intrapéritonéale (cavité abdominale) une fois par jour pendant 5 jours. Les prélèvements de sang lors de la section d’un bout de queue à la naissance des souriceaux sera réaliser une fois par souriceau. Ainsi que le prélèvement de salive à la naissance (au niveau de la face interne de la joue à l’aide d’un petit écouvillon adapté).
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Douleur en post opératoire des injections de MCMV (douleurs de cicatrice). Douleur lors des injections des traitements antiviraux dans la cavité abdominale. Risque d’nfections du site opératoire ou ouverture de la cicatrice après injection du virus aux mères gestantes. Difficulté de prise de poids due à l’infection. Surdité des souris infectées.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Euthanasie des animaux en fin de procédure pour pouvoir faire les analyses sur les tissus (recherche du virus et de signes d’inflammation, recherche d’effets secondaires des traitements).
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
L’objectif de l’étude étant d’évaluer la préservation de l’audition, cette étude ne peut être réalisée que chez l’animal. Compte-tenu de la complexité de structure de l’oreille interne, il n’est pas possible de remplacer ce modèle animal par d’autres modèles ni par des méthodes alternatives ni substitutives.
2. Réduction
Les calculs du nombre d’animaux nécessaire à été fait pour avoir une puissance statistique suffisante compte tenu des variations d’audition entre les groupes. Dans des études précédentes sur ce même virus mais avec des traitements différents , le nombre de souriceaux par femelle gestante était divisé par deux lorsque les souris étaient infectées par le virus, justifiant un nombre important de femelles gestantes (5 par groupe d’étude).
3. Raffinement
Le suivi clinique quotidien permettra d’évaluer la douleur à l’aide d’une grille de score prenant en compte des paramètres suffisamment précoces et prédictifs (comportement de l’animal, blessures éventuelles) permetant de proposer une action pour réduire la douleur (désinfection d’une blessure par exemple) ou qui aboutira à l’euthanasie de l’animal. Les souris seront hébergées dans une animalerie calme, avec enrichissement dans les cages et seront surveillées quotidiennement. Lors des procédures douloureuses ou tests auditifs, ils seront endormis et un traitement anti douleur sera administré.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
La souris constitue l’espèce de choix dans cette infection virale car le MCMV est génétiquement proche du virus humain et les atteintes induite par ce virus sont similaires à celles observées chez l’homme. Les femelles gestantes seront injectées à E13 (13ème jour de gestation). Il s’agit de la période de développement neurologique. Ce stade correspond également à l’apparition et au développement des organes de l’audition, qui se forment entre le 13ème et 18 ème jour de gestation chez la souris. Pour l’étude de la vie des molécules dans la corps de la souris, les souriceaux auront 1 jour de vie et les souris seront adultes afin de pouvoir observer d’éventuelles différences entre l’adulte et le nouveau-né.