Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 28/10/2025
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-161612)
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Les équipes de recherche des instituts utilisent de nombreux modèles génétiques différents chez le poisson zèbre, pour supporter des programmes de recherche visant à la fois à étudier le rôle de gènes dans le développement, à caractériser l’impact de mutations génétiques identifiées chez des patients et à évaluer des stratégies thérapeutiques. Les opérations de cryoconservation et de fécondation in vitro des lignées génétiques impliquées vise à préserver des modèles uniques créés par les équipes de recherches et indisponibles dans le commerce.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Ce projet vise à constituer une banque de sperme de poisson zèbre permettant de sécuriser les lignées uniques développées par les chercheurs utilisant l’animalerie. Cela permettra à la fois de diminuer le nombre d’animaux surnuméraires générés en maintenant des lignées non utilisées en procédures expérimentales mais aussi de limiter les dérives génétiques résultant de croisement à répétition en repartant sur un stock de sperme congélé en utilisant la technique de fécondation in vitro.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Un prélèvement de sperme (1-2 µl) sera réalisé une fois par individu. Dans le cas où le nombre soit insuffisant, jusqu’à 3 prélèvements de sperme pourront être réalisés par individu en respectant un délais d’une semaine entre chaque prélèvement. Les prélèvements seront réalisés sous anesthésie générale. La récolte des oeufs sera réalisé une fois par individu.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Les mâles sont hébergés en situation d’isolement pendant une nuit avant le prélèvement de sperme pour éviter les stimulations avec les autres congénères. L’isolement peut générer de l’anxiété, le poisson étant un animal vivant en groupes sociaux. L’anesthésie générale (environ 2-3minutes) et le temps passé en dehors de l’eau (environ 1minute), nécessaires pour réaliser le prélèvement peut également induire un stress pour l’animal.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Les animaux pour lesquels les lignées ne seront pas maintenues en elevage seront mis à mort par surdosage anesthésique.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Il n’y a pas de remplacement possible, la cryoconservation est la seule méthode possible pour garantir le stockage à long terme de lignées uniques. Elle sera limitée aux lignées originales pour lesquels ces lignées ne sont pas disponibles auprés d’un centre de ressouces
2. Réduction
Le nombre d’animaux a été évalué pour garantir la bonne réalisation de la cryoconservation. La procédure permettra de réduire le nombre d’animaux en élevage.
3. Raffinement
Les poissons sont élevés à 28°C dans une eau ayant un pH de 7,5 avec des cycles jour/nuit de 14h/10h. Nous veillerons à fournir un enrichissement aux poissons grâce à l’apport de nourriture vivante (artémias) et à maintenir un enrichissement social. Lors des prélèvements, les bacs d’anesthésie et de reveil seront maintenus à 28°C par l’utilisation de tapis chauffant. Une anesthésie générale sera réalisée. Des points limites strictes et spécifiques seront appliqués.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Le poisson zèbre se révèle être un modèle de choix pour l’étude des maladies génétiques. Le poisson zèbre présente de nombreuses similitudes avec l’Homme, aussi bien au niveau de sa structure, des mécanismes cellulaires et moléculaires impliqués au cours de son développement. De plus, l’existence de nombreuses lignées transgéniques permettent d’observer par simple microscopie in vivo (méthode non invasive) les différentes populations cellulaires. Les poissons seront utilisés à partir de 3 mois. Il est necessaire que les poissons aient atteint la maturité sexuelle et qu’ils soient en capacité de se reproduire.