Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 2023-01-25 00:00:00
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-498137)
8 236 souris vont être utilisées, toutes tuées à l’issue, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance léger à modéré. Elles subissent des irradiations du corps entier, parfois létales et suivies d’une greffe, ainsi que des injections répétées d’un produit inflammatoire pendant un mois, pour étudier le vieillissement des cellules souches du sang et le risque de leucémie. Le porteur indique que l’irradiation létale peut provoquer des diarrhées et modifier la croissance des dents, et que les injections sont douloureuses. Il affirme que la fonction des cellules souches ne peut être testée qu’in vivo et met en avant des méthodes réduisant le nombre d’animaux.
Résumé produit par un modèle de langage à partir du seul texte du laboratoire, selon une méthode arrêtée par l’OXA. Publié sans relecture individuelle préalable, sous la responsabilité de l’association, et corrigé au fil des relectures.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
Décrire les objectifs du projet.
Note de l'OXA. Cette question est celle du formulaire européen de résumé non technique. Elle est posée au laboratoire qui demande l'autorisation, et sa réponse est écrite avant que la première procédure commence (arrêté du 1er février 2013, art. 5). Ces objectifs servent à justifier l'utilisation des animaux devant le comité d'éthique. Aucun document public ne dira ensuite s'ils ont été atteints : la directive permet aux États de faire mettre à jour le résumé avec les résultats de l'appréciation rétrospective (directive 2010/63/UE, art. 43), la base européenne prévoit de les recevoir, et aucune entrée française n'en porte (base ALURES).
Dans quel but fait-on ça ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les cellules souches du sang s’auto-renouvellent et différencient pour donner l’ensemble des cellules du sang . Avec l’âge, la fonction des CSH est affectée et des mutations apparaissent. L’âge induit un contexte pré-leucémique dans les cellules souches du sang et un risque accru de développer des leucémies (cancers du sang). L’inflammation augmente avec l’âge et est un facteur important du développement de leucémies. Certaines mutations confèrent un avantage compétitif à la cellule mutée, donnant lieu à une production illimitée de cellules cancéreuses. Ces cellules mutées sont sélectionnées et s’amplifient en réponse à des stress tels que l’inflammation ou l’exposition à des rayonnments ionisants, prédisposant ainsi au développement leucémique. Le vieillissement, l’inflammation et les rayonnements ionisants, qui induisent un vieillissement prématuré, induisent des altérations de la disponibilité de l’ADN de la cellule. Notre projet a pour but de caractériser l’impact de l’âge, de l’inflammation et de l’exposition à des rayonnements ionisants dans les cellules souches du sang de souris normales ou présentant une perte de fonction de gènes importants.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Note de l'OXA. Le formulaire européen demande les bénéfices « susceptibles de découler » du projet. Il appelle donc une projection, et il l'obtient : ce que le laboratoire écrit ici est ce qu'il espère, avant d'avoir commencé. Deux chercheuses ont repris six corpus d'études précliniques déjà menées et pesé les dommages réellement infligés aux animaux contre les bénéfices cliniques réellement obtenus : moins de 7 % de ces études ressortaient défendables (Pound et Nicol, 2018).
Est-ce « inutile » ou « nécessaire » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
D’un point de vue fondamental, comprendre comment l’état de protéines déterminant la conformation et la disponibilité de l’ADN cellulaire peut influencer l’identité et la fonction des cellules souches du sang est d’un intérêt majeur pour appréhender les pathologies liées au vieillissement, telles que certaines leucémies. Sur le plan clinique, la découverte de voies susceptibles d’être ciblées thérapeutiquement pour remédier au déclin du tissu régénrateur du sang pourrait conduire à de nouveaux moyens de prévenir ou traiter les leucémies, mais aussi différentes maladies chroniques liées au vieillissement.
Nuisances prévues, selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Note de l'OXA. La formule « en règle générale » autorise une réponse générale, et c'est l'un des points sur lesquels les examens de qualité trouvent ces documents défaillants. Un examen publié en 2018 a établi que les résumés allemands et britanniques décrivaient mal ce qui est fait aux animaux et ce que ceux-ci pourraient éprouver (Taylor et al., 2018). L'adoption d'un modèle commun européen a nettement amélioré le premier point, à peine le second (Taylor et al., 2024).
Le droit d'accès aux documents · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les interventions prévues sur les animaux sont par lots différents: une Irradiation sub-létale corps entier (durée 3 minutes); des injections tous les 2 jours pendant 30 jours (durée 1 minute, anesthésie locale); une irradiation létale (durée 12 minutes) suivie d’une greffe par injection sous anesthésie générale (durée 2 minutes).
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Note de l'OXA. C'est l'endroit du document où les animaux devraient apparaître, et c'est celui qui résiste. Un nouvel examen, publié en 2024, a mesuré que cinq des six éléments attendus sur les dommages prévus progressaient depuis l'adoption d'un modèle commun européen. Les effets indésirables sont le sixième : 41 % des résumés allemands et 48 % des britanniques les décrivent complètement. Les auteurs relèvent aussi des effets présentés comme minimes sur des projets classés modérés ou sévères (Taylor et al., 2024). Ces mesures portent sur l'Allemagne et le Royaume-Uni. L'examen de 2018 classait la France parmi les pays les moins bons pour l'identification, l'accessibilité et la qualité de ses résumés, sans les noter rubrique par rubrique (Taylor et al., 2018). Les résumés français suivent aujourd'hui le modèle européen commun.
Les animaux souffrent-ils ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les injections répétées d’un produit inflammatoire peuvent induire une réponse inflammatoire localisée et douloureuse. L’irradiation léthale peut induire des diarrhées transitoires et des modification de la croissance des dents. Le injections simples induisent très peu de nuisances.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Note de l'OXA. Le formulaire demande de justifier ce sort, non de le décrire. L'analyse dommage-avantage que la directive impose au comité d'éthique porte sur « la souffrance, la douleur et l'angoisse » infligées aux animaux (directive 2010/63/UE, art. 38). Quand ce sort est la mise à mort, celle-ci ne figure donc pas parmi les dommages que le comité met en balance avec les bénéfices annoncés. L'OXA écrit « mise à mort » plutôt que « sacrifice », qui emprunte au registre du don consenti, ou « euthanasie », qui désigne une mort décidée dans l'intérêt de celui qui meurt.
Peut-on parler d'éthique en expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Tous les animaux seront euthanasiés. En effet, à la fin de chaque procédure, nous prélèverons les cellules souchés hématopoïétiques pour réaliser des exériences de génomique, ou les cellules de la moelle osseuse pour analyser le pourcentage de cellules mutées dans la moelle par cytométrie.
Application de la règle des "3R", selon le laboratoire
Réponses rédigées par le laboratoire demandeur, à des fins de communication. Elles ne sont ni sourcées ni relues par des pairs.
1. Remplacement
Note de l'OXA. La directive demande au résumé « une démonstration de la conformité » aux exigences de remplacement, de réduction et de raffinement (directive 2010/63/UE, art. 43). C'est donc le demandeur qui démontre sa propre conformité, dans le document même qui sollicite l'autorisation. Cette démonstration peut prendre la forme d'une affirmation qu'aucune méthode de substitution n'existe, que le document n'a pas à sourcer. Ces trois exigences sont par ailleurs subordonnées à l'objectif du projet : elles cherchent à remplacer les animaux dans un projet donné, elles n'interrogent pas ce projet.
Comment avancer vers la fin de l'expérimentation animale ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
L’hématopoïèse est le processus physiologique qui conduit à la formation de toutes les cellules du sang. C’est un processus qui met en action plusieurs cellules de la niche hématopoïétique, que l’on ne sait pas encore reproduire in vitro. Il ne peut par conséquent pas être totalement étudié in vitro. D’autre part, nous travaillons sur les cellules souches hématopoïétiques, qui différencient dès qu’elles sont mises en culture in vitro : à partir du moment où nous travaillons hors de l’organisme, ce ne sont plus les mêmes cellules. Finalement, si de nombreux marqueurs permettent la caractérisation phénotypique des celluels souches hématopoiétiques, leur caractérisation finale est fondée sur leur capacité unique de reconstituer l’hématopoïèse dans son ensemble dans un organisme vivant. Cette fonction ne peut être testée qu’in vivo.
2. Réduction
Note de l'OXA. La réduction dont il est question ici porte sur le nombre d'animaux par groupe expérimental, calculé pour que l'analyse statistique tienne. Le total annoncé dans la fiche est une estimation portant sur une autorisation de cinq ans au maximum (code rural, art. R214-123) : il ne dit pas combien d'animaux seront effectivement utilisés, et il ne se rapporte pas à une année.
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Nous limiterons au maximum le nombre de souris utilisées. Les nombres d’animaux nécessaires aux différents types d’expérimentation ont été estimés sur la base d’expériences préliminaires, l’objectif étant d’utiliser le nombre d’animaux le plus petit possible tout en étant suffisant pour obtenir des résultats significatifs d’un point de vue statistique. Pour les analyses moléculaires, nous récupèrerons toutes les cellules souches possibles seront utilisées. Pour le séquençage d’acide ribonucléique, nous avons récemment développé des préparations de librairies à partir de petites quantités de matériel. Cette méthodologie, utilisée maintenant en routine au laboratoire, est très importante pour augmenter le nombre d’échantillons exploitables et donc réduire le nombre de souris nécessaires. Une technologie récente, développée au laboratoire cette année, nous permet aussi de faire les analyses épigénétiques sur les cellules issues d’une seule souris quand il en fallait 10 fois plus auparavant. Les expériences de transplantations ne seront réalisées que pour confirmer un effet sur la fonctionnalité des cellules préalablement observée sur des tests in vitro. Les cellules transplantées seront des pools issus de plusieurs souris pour limiter la variabilité inter-individu des souris donneuses.Parmi les souris nées dans les élevages de souris transgéniques les souris non mutées seront aussi utilisées, comme témoins, évitant d’utiliser des souris spécifiques pour cela. Nous utiliserons des tests statistiques pour tester l’effet de plusieurs conditions en parallèle. Concernant les expériences à grande échelle sur génome entier, les analyses statistiques seront faites par des bioinformaticiens.
3. Raffinement
Note de l'OXA. Le raffinement nomme une amélioration technique de la procédure, sans dire ce qu'elle change pour l'animal qui la subit. La réglementation impose d'atténuer la douleur, dans une limite qu'elle inscrit elle-même : « pour autant que cela soit compatible avec la finalité de la procédure expérimentale » (code rural, art. R214-109). Ce qui reste de souffrance après cette limite est autorisé. Le raffinement ne porte par ailleurs que sur la procédure : les souffrances de la captivité elle-même, confinement, bruit, lumière, manipulations d'entretien, ne relèvent d'aucun des trois R.
La réglementation est-elle « très stricte » ? · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
Les injections seront faites sous anesthésie locale ou générale . Une observation des animaux sera réalisée quotidiennement, afin de s’assurer que l’animal ne présente pas de complications. Afin de favoriser le bien-être des animaux, l’hébergement se fera en groupe pour favoriser la socialisation des animaux. Un enrichissement environnemental du milieu (sizzlenests, tunnels, maisons) sera mis en place dans chaque cage. Les animaux seront observés quotidiennement lors de chaque intervention des expérimentateurs (injection, pesées). Des points limites précoces ont été définis et seront strictement appliqués. Les animaux bénéficieront d’un environnement enrichi en tout temps. Un complément alimentaire énergétique et appétent sera ajouté dans les cages après transplantation ou en cas de diminution de la prise alimentaire.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Note de l'OXA. Le dossier d'autorisation demande de justifier l'origine des animaux, leur espèce, leur nombre estimé et leur stade de développement (arrêté du 1er février 2013, art. 5). La justification attendue est technique : elle porte sur l'adéquation de l'espèce à l'objectif poursuivi. Ce que l'appartenance à une espèce autorise à faire subir à un individu est une question morale, et le formulaire ne la pose pas. L'appartenance à une espèce, prise seule, ne fonde pourtant pas de différence de statut moral entre des individus également capables de souffrir.
Spécisme et expérimentation animale · Comment lire un résumé non technique
Texte du laboratoire demandeur, reproduit tel quel
La souris est le modèle de choix pour étudier l’hématopoïèse et la leucémogénèse. Les souris possèdent un système physiologique proche de celui de l’homme. Les souches des animaux sont bien caractérisées génétiquement ce qui permet d’effectuer des transplantations de cellules souches en palliant les problèmes liés au rejet de greffe. De plus, cette espèce permet le développement rapide d’animaux transgéniques qui sont nécessaires pour étudier les rôles de gènes/protéines dans l’hématopoïèse normale et le développement de pathologies en présence d’un système immunitaire compétent. Enfin, Il s’agit d’espèces faciles à élever qui permettent l’obtention relativement rapide de résultats du fait de leur temps de génération réduit. Nous utiliserons des souris de 8-14 semaines car elles sont considérées comme adulte. En effet, dans le cadre de notre étude, nous avons besoin que les animaux aient atteints l’âge adulte.