Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 23/05/2023
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-581855)
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
L’objectif du projet est d’évaluer chez le lapin sur une durée de 7 à 21 jours les effets de nouveaux composés sur une hypertension intraoculaire chronique induite par une injection d’un gel dans l’oeil.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
La cause principale du glaucome (diminution irréversible du champ visuel, 2ème cause de cécité) est une augmentation de la pression intraoculaire à l’origine de la destruction des cellules du nerf optique. Les traitements existants (β-bloquants, analogues des prostaglandines…) ont une efficacité limitée et peuvent présenter des effets indésirables. Ainsi, le bénéfice attendu de ce projet est le développement d’une nouvelle classe thérapeutique pour traiter le glaucome qui touche plus de 800 000 personnes en France.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Les lapins vont recevoir sous anesthésie (durée maximale de 45 minutes) une injection dans l’oeil d’un gel qui va provoquer une augmentation progressive de la pression intraoculaire qui va se maintenir pendant 21 jours. Avant l’injection intraoculaire, les animaux sont habitués pendant au moins 5 jours aux expérimentateurs et au dispositif de mesure de la pression intraoculaire : plusieurs mesures de la pression seront effectuées à l’aide d’un tonomètre vétérinaire sur l’animal éveillé. Des nouveaux composés ou des traitements de référence seront administrés de manière aigüe ou répétée (maximum 2 administrations par jour) afin de tester leur efficacité sur l’augmentation de pression intraoculaire. Des prélèvements sanguins et des du liquide intraoculaire (sous anesthésie) pourront être réalisés afin de vérifier les expositions aux différents traitements effectués.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Deux effets indésirables principaux sont attendus sur les animaux : -Le stress lié à la contention et à la réalisation des mesures de pression intraoculaire (geste non invasif et non douloureux) : pour limiter cet effet, les animaux auront une période d’habituation à la préhension, manipulation des yeux et des mesures de pression. – L’augmentation de la pression intraoculaire : selon la technique utilisée, l’augmentation de la pression devrait être modérée (50 mmHg) et ne devrait pas générer de douleur excessives. Cependant, nous avons mis en place un protocole de suivi et d’identification de points limites permettant de mettre en place des actions en cas d’apparition de douleurs non tolérées ou d’anomalies oculaires.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
A la fin de l’expérimentation chronique, les animaux sont mis à mort. En effet la procédure ne peut pas être répétée plusieurs fois sur un même œil. De plus au sein du laboratoire ces lapins ne peuvent être réutilisés pour d’autres procédures.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Les modèles in vitro modélisant le fonctionnement d’un oeil ne permettent pas de tester les efficacités des molécules thérapeutiques : en effet le maintien de la pression intraoculaire fait intervenir l’interaction de nombreux mécanismes (production/élimination de l’humeur acqueuse, inflammation…).
2. Réduction
En raison de la variabilité liée au modèle, de la variabilité liée aux mesures de pression, un nombre de 8 à 10 lapins par groupe est nécessaire afin de mettre en évidence un effet éventuel d’un produit. Afin de réduire le nombre d’animaux utilisés, les 2 yeux de chaque lapin pourront être inclus dans la procédure. Les analyses statistiques pourront être de trois types : soit en comparant les données après administration du produit à tester aux données mesurées en conditions basales, soit en comparant les données sous traitement à celles recueillies aux mêmes temps dans le groupe contrôle, soit en comparant les données obtenues sur l’oeil d’un lapin en comparaison à l’autre oeil du même lapin qui n’aura pas reçu de traitement ou qui ne recevra pas d’injection intraoculaire afin d’obtenir des valeurs basales et faire des comparaisons appariées.
3. Raffinement
Les animaux sont hébergés individuellement à leur arrivée jusqu’au jour de l’expérimentation. Pour le bien-être des animaux et limiter le stress inhérent à cette espèce, nous veillons à mettre à disposition dans les cages d’hébergement une buchette à ronger et une hutte en polycarbonate rouge dans laquelle le lapin peut venir se réfugier s’il ressent le besoin de s’isoler. Pendant une phase d’habituation d’au moins 5 jours, du foin est mis à disposition de manière journalière ce qui permet de créer un contact régulier avec le lapin et de le familiariser avec l’expérimentateur. A la fin de cette période d’habituation, des mesures de pression à l’aide d’un tonomètre seront effectuées afin de familiariser l’animal avec le dispositif. La mesure de pression à l’aide d’un tonomètre n’engendre aucune souffrance chez l’animal. Chaque mesure de la pression intraoculaire sera associée à une récompense (friandise). L’injection intraoculaire sera effectuée après administration sous forme de gouttes d’un anesthésique local chez un lapin au préalable sédaté. Des points limites stricts et spécifiques ont été définis et seront appliqués.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
L’oeil du lapin par sa physiologie et sa taille relativement proche de celle de l’oeil humain est le modèle de référence pour étudier les propriétés de nouvelles molécules sur la pression intraoculaire. De plus, cette taille de l’oeil facilite la précision du geste d’injection intravitréenne et facilite également la mesure de la pression intraoculaire à l’aide de tonomètres vétérinaires. L’expérimentation sera réalisée sur des lapins adultes. Le glaucome est une pathologie apparaissant avec l’âge, il n’y a aucune raison de travailler sur des individus en cours de développement.