Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 28/05/2025
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-601259)
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Ce projet a pour objectif de mettre au point une injection intra-nasale d’une molécule pharmacologique chez la souris. Cette voie de pénétration dans l’organisme par le museau de l’animal a le grand avantage d’être non-invasif.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
En procédant à la mise au point de l’injection intranasale de l’exendine-4, cette étude pilote nous donnera la possibilité de maitriser une méthodologie de pénétration intracérébrale de cette molécule de manière non-invasive et ainsi de contribuer ultérieurement à mieux comprendre ses effets centraux.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
L’intervention consiste à procéder à une injection intranasale qui durera 6 secondes (2 * 3 secondes par narine).
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
L’injection intranasale pourrait entrainer une gêne respiratoire comme nuisance.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Tous les animaux auront une perfusion intracardiaque de PFA 4% avant de procéder au prélévement des tissus (muqueuse olfactive dans le museau; bulbe olfactif dans le cerveau) afin de vérifier la présence de la molécule d’exendine-4 fluorescente. Cela permettra de valider le protocole d’injection intranasale non-invasive de ce produit pharmacologique chez les souris femelles et mâles.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Le but de ce projet pilote est de pouvoir injecter et faire pénétrer une molécule pharmacologique dans le cerveau par voie intranasale afin d’avoir une voie d’accès non-invasive. Cela nécessite un animal vivant et de procéder à une injection in vivo.
2. Réduction
Le nombre de souris pour ce projet pilote est réduit à son minimum afin d’avoir une preuve de concept méthodologique validée avant de travailler avec cette méthode non-invasive sur des projets futurs autour de l’obésité et du diabète dans les modèles murins. Ainsi, l’observation de la pénétration de la molécule fluorescente d’exendine-4 dans la muqueuse olfactive et le tissu cérébral après injection intranasale de 3 souris par sexe, par dose et par temps de pénétration constituera une preuve de concept méthodologique. 2 doses à 3 temps de pénétration pour chaque dose et l’étude des 2 sexes conduisent à 36 souris.
3. Raffinement
Toutes les souris seront acclimatées à l’animalerie pendant au moins une semaine avant de procéder aux expériences. Elles seront hébergées dans des cages avec enrichissement sensoriel (nid, bois à ronger, tunnel). Les animaux seront regulièrement examinés (poids, apparence, comportement). Les souris seront habituées à la contention avant la procédure expérimentale. Pour éviter tout problème respiratoire pendant l’injection intra-nasale chez la souris, il sera procédé à une injection par narine à la fois avec un temps de pause de 3 minutes entre chaque injection pour laisser le temps à la souris de récupérer de la première contention et également d’observer son comportement. Pour procéder à la perfusion intracardiaque avec une respiration et des battements cardiaques à l’arrêt, une euthanasie sera réalisée par injection intrapéritonéale d’une dose d’anesthésiant à dose élevée, précédée 15 minutes avant d’une injection intrapéritonéale d’un sédatif.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Nos souris sont très bien caractérisées à l’âge adulte au niveau métabolique depuis plusieurs dizaines d’années dans plusieurs laboratoires, et représentent un modèle animal adéquat pour l’étude comme modèle d’étude des maladies humaines. De plus, nous avons l’expertise du suivi du bien-être de l’animal après injection, du phénotypage métabolique des souris.