Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 2023-06-26 00:00:00
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-754109)
268 bars européens vont être utilisés dans des procédures impliquant un niveau de souffrance modéré, une partie tuée pour analyse et l’autre gardée vivante pour produire des gamètes. Au stade larvaire, ils reçoivent une injection de cellules souches germinales d’anguille européenne et, pour certains, une puce d’identification sous anesthésie, afin de tester le bar comme parent de substitution de l’anguille. Le porteur indique que les larves ne récupérant pas une nage normale dans les cinq minutes sont tuées par surdose d’anesthésique. Il présente l’anguille comme un « produit à haute valeur ajoutée » et affirme qu’il n’existe « pas d’alternative » non animale, le bar étant lui-même le sujet de l’étude.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Ce projet étudie la possibilité d’utiliser des bars européens comme parent de substitution d’anguilles européenne afin de pallier à l’infertilité des anguilles maintenues en captivité.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
L’anguille européenne est considérée comme un produit à haute valeur ajoutée sur les marchés européens et asiatiques, ce qui en fait une cible pour la pêche et l’aquaculture. Cependant, elle ne peut pas atteindre la maturité sexuelle normalement en captivité, et sa production est basée sur la capture de juvéniles (civelles) et leur engraissement ultérieur. La population d’anguilles européennes étant en grave déclin, la reproduction en captivité semble être la seule alternative réaliste pour réduire la pression sur les populations naturelles. Le développement de la technologie des géniteurs de substitution par la transplantation de celulles souches germinales permettra de produire les gamètes d’anguille nécessaires au développement de l’aquaculture de l’anguille et à la diminution des captures de juvéniles dans le milieu naturel.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Les animaux seront soumis à une seule injection au stade larvaire pour injecter les cellules souches germinales. L’injection de cellules souches germinales ne dure pas plus de 20 secondes. Une partie de ces animaux sera marquée avec une puce électronique intramusculaire pour une identification individuelle. Ce marquage qui ne prend que quelques secondes, est réalisé sous anesthésie.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
L’injection des larves est équivalente à une piqûre. Le marquage des poissons est équivalent à une piqûre. Pour chacun de ces gestes, l’anesthésie ne durera pas plus de 5 min.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Une partie des animaux seront euthanasiés pour réaliser le suivi de la colonisation des cellules souches d’anguilles. Le reste sera gardés en vie pour produire des gamètes.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Il n’y a pas d’alternatives non animales disponibles pour cette expérimentation. Le bar est le sujet de l’étude. Il s’agit dans cette étude de tester le bar européen comme receveur de cellules souches germinales d’anguilles.
2. Réduction
Comme nous connaissons le taux de survie des bars après micro-injection, le nombre d’animaux utilisés sera le minimum possible afin d’assurer une puissance nécessaire des résultats des échantillonnages. Pour cette expérimentation, 2 lots de 134 poissons (soit 268 poissons) seront injectés afin d’obtenir entre 15 et 20 poissons greffés par lots. La survie à l’élevage larvaire peut être estimée à 85% et le taux de réussite de greffe est de 15% donc 134 poissons injectés x 0.85 de survie x 0.15 de succès de greffe = 17 poissons réellement greffés. Aux 268 poissons injectés, il faut ajouter 132 poissons-témoins ne subissant aucune procédure. Le total des poissons utilisés est 268 poissons injectés +132 poissons-témoins. Il s’agit d’une recherche descriptive du phénomène de colonisation des gonades du receveur par les cellules souches du poisson-donneur. Il ne sera donc pas réalisé de test statistique sur cette expérimentation. Le nombre de 15 poissons greffés a été choisi en accord avec le nombre d’invididus généralement étudiés pour ce type de recherche dans la littérature.
3. Raffinement
Pour favoriser le rétablissement des larves micro-injectées, celles-ci sont maintenues dans de l’eau iso-osmotique stérile et gardées sous une surveillance accrue pendant les 4 heures suivant l’injection. En dehors des procédures, les animaux seront maintenus dans des conditions d’élevage optimales pour leur espèce. Les poissons sont manipulés sous anesthésie pendant moins de 5 minutes. Suite à cette anesthésie, les poissons sont réveillés dans de l’eau de mer. Le point limite suivant sera observé après les phases d’injection des cellules souches germinales et de marquage: tous les animaux ne récupérant pas une nage normale dans les 5 minutes après ces actes seront euthanasiés par une surdose d’anesthésie précédée d’une anesthésie.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Le bar est une espèce dont l’élevage est maitrisé, et pour laquelle la technique de transplantation des cellules souches germinales a été mise au point. Les larves de bars utilisées seront âgées de 60 jours. Les larves âgées de 60 jours pèsent 15 mg, poids requis pour permettre leur manipulation. Leur jeune âge permet d’avoir 15% de succès de greffe, car leur système immunitaire n’est pas complètement mis en place ce qui évite le rejet de la greffe.