Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 2024-03-28 00:00:00
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-780960)
Remplacer une hormone extraite du sang de juments gravides saignées à répétition, pour mieux contrôler la reproduction des brebis et des chèvres d’élevage: 256 souris vont être utilisées, toutes tuées à l’issue, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance léger pour la plupart, modéré pour vingt d’entre elles, vingt autres étant opérées sous anesthésie et tuées avant tout réveil. Elles reçoivent jusqu’à trois injections et des prélèvements de sang à la queue, avant d’être tuées pour que leurs voies génitales et leurs cerveaux soient prélevés. Le porteur affirme que l’ovulation ne peut s’étudier qu’in vivo et que tester un bloqueur d’un système physiologique complexe exige « l’animal entier ». Il présente le projet comme un gain de bien-être pour les juments, alors que la finalité immédiate reste d’améliorer le contrôle de la reproduction dans les élevages.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Chez les mammifères existent deux types d’ovulations : spontanée et induite. Une substance nommé b-NGF est considérée responsable du déclenchement de l’ovulation chez les espèces à ovulation induite. Notre projet vise à comprendre si aussi chez les espèces à ovulation spontanée cette molécule est capable d’induire l’ovulation. Nos résultats permettront de mieux comprendre les mécanismes qui sont à la base de l’induction de l’ovulation et seront utiles pour améliorer le contrôle de la reproduction chez les animaux domestiques.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Une des produits utilisé pour contrôler la reproduction chez les animaux domestique, tel que les brebis et les chèvres, est une molécule appelée PMSG. Cette molécule est extraite du sang de juments gravides qui sont saignées très souvent. La production de cette molécule pose donc un problème de bien être animale. La molécule (b-NGF) que nous sommes en train d’étudier peut, à différence de la PMSG, être synthétisée en laboratoire. Si nous arrivons à démontrer que le b-NGF peut induire l’ovulation il sera envisageable de l’utiliser à la place de la PMSG avec un bénéfice pour le bien être animale.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Les animaux seront soumis à des prélévements de sang. Pour chaque prélévement seront collecté 3 µL dans l’espèce de 3-5 seconds
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Les prises des sang à la queue peuvent engendre une légère douleur et la contention de l’animale pour réaliser la prise de sang un stress leger.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Pour pouvoir détecter les oocytes dans le système génital des femelles et analyser l’expression des protéines d’intérêt dans les cerveaux il est nécessaire d’euthanasier toutes les souris.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
L’ovulation est un phénomène complexe qui ne peut être étudiée qu’in vivo. Nous avons recours à un protocole classiquement utilisé qui est réalisé sur la souris prépubère. Avenant: Le test d’efficacité d’un bloqueur d’un système physiologique complexe ne peut se faire que sur l’animal entier.
2. Réduction
Le choix du nombre d’individus par lots a été statistiquement déterminé. Les paramètres suivant ont été pris en compte : pour un taux d’ovulation attendu de 80% dans nos conditions de traitement et un taux d’ovulation basal de 20% avec un intervalle de confiance à 95%, il faut 5 souris par lot. Si l’effet de nos molécules est moins important que notre témoin positif et que le taux d’ovulation observé n’est que de 60% alors il faut 11 souris par lots. Par sécurité, nous avons choisi un effectif de 10 souris par lot afin de pouvoir exploiter les résultats. Dans un autre projet ce nombre d’individus avait permis l’obtention de résultats statistiquement exploitables.
3. Raffinement
Les souris seront hébergées par quatre en présence d’igloos en carton. Les animaux recevront au maximun 3 injections de 0.1mL (2 IP et 1 IM) : de eCG et « traitements ». Aucun des produits que nous souhaitons utiliser ne sont connus pour avoir des effets nocifs sur la santé des animaux. Une surveillance des animaux sera instaurée avec un passage deux fois dans la journée de l’injection. Un massage local après chaque injection, sera effectué pour diminuer les sensations douloureuses. Lors des procédures expérimentales qui demandent une intervention chirurgicale les souris est anesthésiée. En outre un analgésique est injecté par voie sous-cutanée au début de la chirurgie. Suite à la chirurgie les animaux seront surveillés régulièrement et leur état évalué selon un’échelle permettant d’établir un score de bienêtre. Dans le cas le score indique une perte de bienêtre important l’animal sera euthanasié.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
C’est l’espèce de référence du protocole utilisé en routine par de nombreux laboratoires L’utilisation de la souris prépubère est aussi celle qui permet d’obtenir des résultats les plus facilement interprétable tout en utilisant un minimum d’animaux. En effet, ces souris permettent d’éviter la commande de mères gestantes chez lesquelles les mâles n’auraient pas d’utilité dans cette expérience (l’ovulation est un phénomène spécifique au sexe femelle). L’utilisation de souris adultes impliquerait que nos résultats seraient parasités par les ovulations naturelles des individus réduisant donc notre discrimination entre ce phénomène et l’efficacité de notre traitement. Assurer dans ce cadre des résultats viables passerait automatiquement par une augmentation du nombre d’animaux par lot. Avenant 03-21: 20 souris adultes seront utilisées dans ce protocole. En effet, nous souhaitons caractériser les cellules exprimant le recepteur p75 chez l’adulte.