Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 29/11/2024
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-869442)
Des souris immunodéficientes, incapables de rejeter des cellules humaines, reçoivent une greffe de cellules d’épendymome directement dans le cerveau. 217 souris vont être utilisées dans des procédures impliquant un niveau de souffrance sévère, toutes tuées à l’issue. 210 d’entre elles subissent une craniotomie d’une trentaine de minutes, et 127 reçoivent jusqu’à quinze administrations orales de disulfiram et de gluconate de cuivre. La croissance de la tumeur cérébrale provoque une perte d’appétit puis un amaigrissement, et les mises à mort interviennent dans le cadre d’études de survie, donc au terme de la progression tumorale, pour prélever les cerveaux.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
L’objectif de ce projet est double: 1) Il consiste en la mise en place de deux modèles animaux d’épendymomes (tumeurs cérébrales) au sein de notre laboratoire. Ces modèles nous permettront de tester l’efficacité de nouveaux médicaments contre ces tumeurs pour lesquelles la médecine ne dispose actuellement que d’un arsenal thérapeutique limité. 2) Nous utiliserons ces modèles pour tester in vivo l’efficacité de deux composés administrés en combinaison, le disulfiram et le gluconate de cuivre, sur la progression tumorale. La validation in vivo de l’efficacité de ces composés sur le developpement de la tumeur pourrait permettre la mise en place de nouvelles stratégies thérapeutiques contre les épendymomes.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Les épendymomes sont la troisième tumeur du système nerveux central de l’enfant la plus courante. Le pronostic dépend de l’âge de l’enfant mais malgré un traitement agressif, le taux de survie à 10 ans de l’épendymome est de 50 à 70 %. Il est donc important de proposer aux patients de nouvelles thérapies pour améliorer le résultat clinique. La validation in vivo de l’efficacité d’un traitement combiné de disulfiram /gluconate de cuivre permettrait la mise en place de nouvelles stratégies thérapeutiques contre les épendymomes.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Des animaux recevront une administration orale de composés (127 animaux, intervention de 30 secondes environ, 15 interventions maximum/animal). Des animaux recevront une greffe intracérébrale de cellules tumorales d’épendymome (210 animaux, une seule intervention de 30 minutes environ). Les greffes intracérébrales sont des procédures chirurgicales.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
La manipulation, contention des animaux, les injections d’anesthésiques ou d’analgésiques sont générateurs de stress pour les animaux. Les injections entrainent également une douleur légère de courte durée. La craniotomie peut générer des douleurs post-opératoires minorées par l’administration d’antalgiques. La progression tumorale induite par la maladie (ependymome) provoque à terme une perte d’appétit, donc une malnutrition et finalement une perte de poids.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Tous les animaux seront euthanasiés dans le cadre des études de survie, pour les analyses histologiques ou de progression tumorale (prélèvement de cerveaux) et à la fin de l’étude de dose maximum tolérée (une semaine après la dernière administration).
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Le ciblage du cerveau et de la tumeur par les médicaments vectorisés et l’efficacité therapeutique de ces derniers nécessitent une approche expérimentale in vivo. En effet, il n’existe pas à ce jour de système suffisamment robuste pour mimer toute la complexité biologique et physiologique des épendymomes. Ce travail sur l’animal vivant s’inscrit dans la continuité d’expériences et de résultats que nous avons obtenu in vitro.
2. Réduction
Le nombre d’animaux prévu dans chaque groupe est basé sur un calcul d’effectif permettant de prédire que nous avons 80% de chance d’obtenir un résultat statistiquement significatif.
3. Raffinement
La détection de toute souffrance de l’animal sera assurée et le niveau de souffrance évalué en fonction d’une grille de score. En fonction des scores obtenus, il sera envisagé une analgésie ou l’euthanasie de l’animal. Pour le bien-être de l’animal, les souris seront logées selon les normes requises avec un enrichissement (copeaux de bois, dômes) et en groupes de 5 individus par cage afin d’éviter le stress de l’isolement. Les cages pourvues de couvercles filtrants seront disposées dans une armoire ventilée.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
L’utilisation de lignées murines immunodéficientes permet la transplantation de cellules d’une espèce donnée (humaine) chez un individu hôte d’une espèce différente (souris). Les tumeurs d’épendymome générées dans l’un des deux modèles mis en place sont particulièrement similaires aux tumeurs humaines. Les souris seront réceptionnées à l’animalerie à l’âge de 5 semaines et utilisées à l’âge de 6 semaines, en accord avec les protocoles décrits pour ces modèles physiopathologiques.