Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 12/07/2022
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-810461)
200 lapins vont être utilisés, tous tués à l’issue, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance modéré. Ils reçoivent des injections répétées d’un antigène et d’un adjuvant sous la peau ou dans le derme, puis des prélèvements sanguins aux oreilles sur animaux vigiles, avant un prélèvement terminal au cœur sous anesthésie, pour produire des anticorps polyclonaux destinés à la recherche ou au diagnostic. Le porteur indique que l’inoculation peut provoquer une hyperthermie, une forte inflammation locale, une ulcération ou une nécrose. Sur le remplacement, il affirme que la production d’anticorps polyclonaux ne peut être reproduite in vitro de façon satisfaisante et retient donc le lapin pour son volume sanguin et sa réponse immunitaire.
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Produire sur lapins de grandes quantités de très bons anticorps polyclonaux spécifiques avec une haute affinité dirigés contre des protéines d’intérêt, pour des activités de recherche ou de diagnostic.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
L’antigène est produit par le demandeur qui doit fournir des informations permettant d’évaluer une toxicité intrinsèque de la molécule injectée, et les possibles conséquences sur l’état général de la production d’anticorps contre cette molécule. En fonction des informations fournies et du risque évalué, il pourra être demandé de tester la toxicité de la molécule in vitro dans un modèle cellulaire avant de l’injecter au lapin.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Injections sous-cutanées ou intra-dermiques sur animaux vigiles : 200 lapins. Durée, quelques secondes Prélèvement sanguin (oreilles) sur lapins vigiles : 200 animaux. Acte qui dure quelques secondes Prélèvement sanguin (cœur) sur lapins anesthésiés (acte terminal) animaux : Acte qui dure quelques minutes
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
Il se peut que l’inoculation d’une protéine (ou l’adjuvant utilisé) induise une réaction inhabituelle plus générale (hyperthermie) ou intense (forte inflammation locale, ulcération, nécrose). Pour cette raison, l’état général des animaux et les points d’injection seront surveillés pendant les 72h premières heures, puis régulièrement. Le protocole d’immunisation sera interrompu si des signes généraux sont observés. Les soins adéquats seront apportés à l’animal (anti-inflammatoires, antibiotiques, soins locaux). Les injections et les prélèvements sanguins de petit volume ne requièrent qu’une contention. Le prélèvement terminal (grand volume) sera réalisé sous anesthésie générale.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Tous les animaux seront mis à mort à la fin de la procédure pour un prélèvement sanguin terminal afin de répondre à l’objectif scientifique
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
La production d’anticorps polyclonaux dirigés contre un antigène résulte de la stimulation de différentes populations leucocytaires qui ne peut être reproduite de façon satisfaisante et efficace in vitro. Certains tests pour évaluer la toxicité d’antigène seront réalisés in vitro avant l’animal.
2. Réduction
Dans la très grande majorité des cas, un seul animal est nécessaire pour obtenir la quantité d’anticorps nécessaire pour les travaux scientifiques. Dans certains cas (échec de l’immunisation ou besoin de très grandes quantités d’anticorps), il peut être nécessaire d’utiliser 2 ou 3 animaux. Nous estimons que le nombre de demandes de production d’anticorps polyclonaux portera sur un total d’environ 40 animaux par an.
3. Raffinement
Il se peut que l’inoculation d’une protéine (ou l’adjuvant utilisé) induise une réaction inhabituelle plus générale (hyperthermie) ou intense (forte inflammation locale, ulcération, nécrose). Pour cette raison, l’état général des animaux et les points d’injection seront surveillés pendant les 72h premières heures, puis régulièrement. Le protocole d’immunisation sera interrompu si des signes généraux sont observés. Les soins adéquats seront apportés à l’animal (anti-inflammatoires, antibiotiques, soins locaux…). L’animal sera mis à mort si aggravation des signes clinique malgré le traitement. Les injections et les prélèvements sanguins de petit volume ne requièrent qu’une contention, une préparation aseptique et une anesthésie locale. Le prélèvement terminal (grand volume) sera réalisé sous anesthésie générale.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Le lapin est une espèce de taille intermédiaire (on peut utiliser aussi la souris, des petits ruminants ou des équidés) dont la réponse immunitaire et le volume sanguin circulant permettent d’obtenir les quantités d’anticorps nécessaires aux projets des entités de recherche Jeune adulte de 2,7 à 3 kg (âge optimal pour la réponse immune)