Résumé non technique d'un projet d'expérimentation animale publié sur ALURES le 28/08/2025
("EC NTS/RA identifier" : NTS-FR-197098)
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet.
Les objectifs de ce projet sont de caracteriser la toxicité, les effets anti-inflammatoires sur la cellule d’un composé synthétique, au cours d’un stress métabolique chez la larve de poisson zèbre. Cette molécule qui est développée par une start-up est connue pour inhiber la réaction inflammatoire via le bloquage d’acteurs intracellualires favorisant la réaction inflammatoire.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet?
Déterminer l’effet d’une molécule anti-inflammatoire, la fenêtre de dose efficace et non toxique sur des larves de poisson zèbre.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale?
Les animaux seront soumis pour chacune des phases, à un traitement avec une molécule fluorescente, appelée BODIPY (Minchin JEN et al 2011) qui a une affinité toute particulière pour les lipides. Nous incuberons les larves, une seule fois, la veille de l’euthanasie, avec du BODIPY- comme déjà decrit dans la litterature (Minchin JEN et al 2011) – pour une durée de 12 heures.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux et la durée de ces effets?
A haute dose, il est possible que nous observions de la letalité meme si à ce jour, et aux doses testées aucune toxicité n’a été repertoriée in vitro sur les cellules et in vivo chez la souris au cours d’etudes préliminaires chez la souris.
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
Toutes les larves seront euthanasiées pour les 3 procédures.
Application de la règle des "3R"
1. Remplacement
Dans le cadre de ce protocole nous comptons manipuler 3 lignées génétiquement modifiées de larves de poisson zèbre. Ces lignées combinées à la puissance exploratoire du modèle poisson zèbre font de ce poisson un modèle unique et indispensable à l’échelle de l’organisme entier pour étudier de manière intégrée le rôle de l’anti-inflammatoire dans le développement de l’inflammation associée à la progression de l’obésité (principe de remplacement).
2. Réduction
Compte tenu de la variabilité des paramètres biologiques généralement observée au sein d’un groupe homogène et de la durée des protocoles, des groupes de 20 larves par condition seront formés afin de pouvoir mettre en évidence des différences statistiques. Pour les tests de toxicité, nous utiliserons 100 larves par dose, pour avoir des courbes de survie robustes et fiables et être sur de nos conclusions (principe de réduction).
3. Raffinement
Les larves inclues dans les procédures sont hébergées dans un bac d’eau osmosée dont les paramètres biologiques sont trés controlés, comme la température ou le pH. Les procédures seront réalisées dans le respect du bien-être animal, sous anesthésie lorsque nécessaire pour limiter la souffrance, la douleur ou l’angoisse des animaux, et en respectant des points limites définis par le comportement des animaux, que ce soit leur comportement alimentaire, leur locomotioncou leur fonction respiratoire (battements cardiaques et mouvements des branchies) (principe de raffinement).
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents.
Le poisson zèbre ou Brachydanio rerio est génétiquement modifiable et permet des études de grandes envergures de la même portée que celles réalisées chez la souris, tout en étant plus rapides et beaucoup moins couteûses. De plus, un nombre quasi indéfini d’événements biologiques est quantifiable par des approches non invasives et quantitatives. Actuellement, un très grand nombre de lignées transgéniques ont été générées et sont disponibles dans la communauté scientifique, et permettent de répondre à de vraies questions biomédicales. En tant que laboratoire académique nous pouvons facilement avoir accès à un très grand nombre de lignées transgéniques (peu onéreuses). Pour toutes ces raisons, le poisson zèbre est à l’heure actuelle un modèle trés pertinent utilisé dans de nombreux laboratoires académiques pour modéliser un large spectre de pathologies avec la possibilité d’aller trés en profondeur pour l’exploration mécanistique. Les animaux seront utilisés au stade larvaire. L’idée est d’abord d’établir une preuve de principe de l’efficacité d’action de l’anti-inflammatoire, chez la larve avant de passer en cas de résultats encourageants à une étude chez le poisson adulte.