Alimentation animale

450 oies vont être utilisées, toutes abattues à l'issue pour analyser leur foie, dans des procédures classées en niveau de souffrance léger. Elles subissent six semaines de restriction alimentaire, dont un aliment carencé en donneurs de méthyle, puis du maïs à volonté, pour mettre au point un foie gras obtenu sans gavage et destiné à la commercialisation. Le porteur affirme que le régime carencé n'entraîne pas d'effets délétères et prévoit une observation biquotidienne. Il présente ce foie gras spontané comme une solution "éthiquement acceptable" tout en visant la production d'un nouveau produit commercial.

Objectifs

La production du foie gras, et notamment l’acte de gavage (alimentation forcée), est de plus en plus remis en question. Afin de trouver une alternative, plusieurs recherches se sont inspirées du comportement d’hyperphagie (prise d’aliment importante dans un court laps de temps) et d’engraissement spontané observé à l’état naturel chez les oiseaux durant la période pré-migratoire. Il a été démontré qu’en combinant une restriction alimentaire suivie d’une distribution à volonté du maïs et une réduction de la durée du jour, il était possible d’induire un comportement d’hyperphagie chez le jars et un engraissement du foie. Malgré ces résultats prometteurs, les foies étaient nettement moins lourds que ceux obtenus par gavage (445g contre 1100g) et la variabilité individuelle était 2,5 fois plus élevée. Le caractère aléatoire de l’engraissement du foie est aujourd’hui un frein au développement de ce type d’élevage. Ce projet a pour but d’étudier l’établissement des mécanismes cellulaires et moléculaires impliqués dans le développement des foies engraissés et de définir des pratiques d’élevage induisant efficacement, l’engraissement du foie sans acte de gavage, chez l’ensemble des oies d’une bande. Dans cet essai, l’accent sera mis tout d’abord sur les aliments distribués au cours de la phase de restriction alimentaire. Chez les mammifères, les aliments déficients en donneurs de groupements méthyles (molécules capables de céder à d’autres molécules leur groupement méthyle composé d’un atome de carbone lié à 3 atomes d’hydrogène) tels que la méthionine, choline et vitamines B12 et B9 entraînent une accumulation des lipides dans le foie. Dans cet essai, nous proposons de donner, au cours de la phase de restriction, deux aliments avec différents taux de donneurs de groupements méthyles afin d’initier un début d’engraissement du foie avant la phase de libération au maïs. Puis, nous testerons l’effet du mode de conservation du maïs grain humide ou sec sur la consommation des oies et leur capacité à développer un foie engraissé. En effet, les études qui ont obtenu les meilleurs résultats sur la consommation des oies et sur l’engraissement du foie, ont utilisé du maïs. Nous avons émis l’hypothèse que le maïs inerté pouvait être plus appétant et donc jouer un rôle sur l’engraissement du foie. En étudiant ces deux hypothèses, nous espérons réduire la variabilité du poids de foie et ainsi identifier des pratiques d’élevage qui pourraient remplacer l’acte de gavage.

Bénéfices attendus

Ce projet contribuera à enrichir les connaissances scientifiques sur l’engraissement spontanée du foie d’oie et à trouver des solutions pratiques et éthiquement acceptables pour produire et commercialiser un nouveau produit de type foie d’oie engraissé spontanément.

Procédures

Les animaux seront soumis, pour une durée de six semaines à compter de leur quatorzième semaine d'âge, à une phase de restriction alimentaire qui permet de maintenir les individus dans un état physiologique stable tout en empêchant un engraissement excessif. Au cours de cette restriction, certains individus recevront un aliment carencé en donneurs de groupements méthyles (méthionine, choline, vitamine B12 et B9). Cet aliment n’est pas connu pour entrainer d’effets délétères sur les individus (perte de poids, anorexie, sélection liée à des mortalités ou retards de croissance).

Impact sur les animaux

Les précédents essais réalisés avec des régimes carencés en donneurs de groupements méthyles n’ont pas entrainé d’effets délétères sur les individus (perte de poids, anorexie, sélection liée à des mortalités ou retards de croissance). Toutefois, une observation biquotidienne des animaux sera réalisée (comportement, consommation, mortalité) tout au long de l’élevage et au cours de la restriction afin de s’assurer du bon état de chaque animal. De plus, la taille des trémies sera suffisante pour que tous les animaux puissent y accéder simultanément, afin d’éviter la compétition à la mangeoire.

Devenir

Les animaux seront abattus afin d’effectuer post mortem des analyses biochimiques, histologiques et moléculaires sur le foie, le sang et le tissu adipeux. La mise à mort sera effectuée en abattoir agréé selon les modalités conventionnelles d’abattage utilisées en abattoir (règlement CE N°1099/2009).

Remplacement

Les effets physiologiques escomptés (engraissement spontané du foie) ne peuvent être observés que sur les animaux vivants. Les lignées cellulaires ou des simulations informatiques ne peuvent en aucun cas remplacer l’animal vivant.

Réduction

450 oies mâles seront requis, ce qui constitue un nombre minimal pour tester statistiquement les hypothèses compte tenu de la variabilité individuelle observée dans les analyses antérieurs et des aléas experimentaux. En effet, des études antérieures sur l’engraissement spontané du foie chez le jars nous ont permis d’évaluer le nombre d’animaux nécessaires pour ce projet. La consommation des animaux, et donc l’engraissement du foie, est sujet à une très forte variabilité. C’est pour cette raison que si nous voulons observés des différences entre les paramètres physiologiques, biochimiques et moléculaires nous avons besoin d’au moins 30 individus par prélèvement.

Raffinement

Les animaux seront hébergés dans des conditions optimales durant l’expérimentation. Plus précisément, 450 individus seront répartis dans 18 loges avec une surface au sol de 12m2 soit une densité de 2 oies/m2, conformément aux densités effectuées en élevage conventionnel. Avant l’arrivée des animaux, de la litière de bouchon de paille sera placée au sol. Les bâtiments seront préparés au moins 48h à l’avance. Des consignes d’ambiance conventionnelles seront appliquées. La température, hygrométrie et ventilation seront gérées par un boitier automatique selon les paramètres définis préalablement en prenant en compte les besoins physiologiques des animaux (âge, poids, nombre d'animaux dans le bâtiment) et au jugé de l’opérateur. L’éclairement et la température seront contrôlés quotidiennement via un système de suivi automatisé. L’alimentation se fera manuellement dans des trémies métalliques (1 par loge) et chaque loge disposera de deux lignes de pipette et d’un seau d’eau pour abreuver les animaux. Enfin, aucun prélèvement ne se fera sur les animaux vivants.

Choix des espèces

Au-delà de son importance agronomique et commerciale, l’oie Grise du Sud Ouest (Maxipalm) est proche de son ancêtre, l’oie cendrée sauvage et migratrice et présente une forte capacité d’ingestion et une propension naturelle à un engraissement spontané. Les animaux utilisés pour l’essai seront âgés de 98 à 210 jours. Lors de leur arrivée, à 14 semaines d’âge, ils seront soumis à une phase de restriction alimentaire pendant 6 semaines afin d’induire une prise alimentaire importante dans une courte période de temps, durant la distribution à volonté du maïs. La distribution à volonté du maïs durera 10 semaines, temps nécessaire pour observer un engraissement du foie. Dans le but d’étudier l’impact d’une déficience en donneurs de groupements méthyles à court terme, au cours des semaines 14 et 19 d’âge, deux prélèvements de sang, foie et tissu adipeux seront réalisés post-mortem sur certains individus. Dans un second temps, 3 prélèvements (semaine 24, 27 et 30) seront effectués post-mortem (prélèvement du foie, sang et tissu adipeux) afin d’étudier la mise en place des mécanismes cellulaires et moléculaires impliqués dans le développement des foies engraissés ainsi que pour étudier l’impact du maïs humide dans l’engraissement spontané du foie.

32 veaux vont être utilisés, dans des procédures déclarées de niveau léger, puis renvoyés dans l'élevage et réutilisés pour d'autres expériences. Dès leur naissance, ils reçoivent des immunoglobulines par voie orale et subissent six prises de sang sur trois semaines ainsi qu'un prélèvement de fèces, pour comparer l'absorption d'immunoglobulines issues du lactosérum et du colostrum. Le porteur indique une anesthésie locale avant chaque prise de sang et une contention de deux minutes. Il présente ce travail comme un moyen de valoriser une ressource industrielle, les immunoglobulines de lactosérum, pour l'élevage bovin et caprin.

Objectifs

Le projet vise à tester l’intérêt d’un apport d’immunoglobulines issues de lactosérum en complément du colostrum. Les immunoglobulines extraites du lactosérum constituent une ressource potentielle qui pourrait être distribuée aux veaux, agneaux et chevreaux dans le but d’améliorer le transfert d’immunité passive. D’un point de vue scientifique, il s’agit de déterminer dans quelle proportion les immunoglobulines, extraites du lactosérum et apportées par voie orale en complément du colostrum dans les 2 premières heures de vie, sont transférées vers la circulation sanguine. Cela pose notamment la question du rôle des cofacteurs permettant de protéger les immunoglobulines lors du passage dans le compartiment sanguin et/ou agissant sur la perméabilité intestinale. D’autre part, un apport en faible quantité d’IgG (Immunoglobuline G) issues de lactosérum durant les 20 jours suivants la naissance est testé dans le but de déterminer si un apport régulier d’IgG par voie orale permet de préserver le pool d’IgG circulantes du fait d’une remobilisation plus limitée de celles-ci en direction de la lumière intestinale. Deux procédés d’extraction/concentration des IgG lactosériques sont envisagés. Ces procédés ont potentiellement un effet sur l’activité immunologique des immunoglobulines et notamment leur capacité à être absorbées. L’étude comprend 2 essais, reposant sur le même schéma expérimental, afin de tester les IgG extraites selon les 2 procédés et choisir le procédé le plus pertinent.

Bénéfices attendus

L’échec de transfert d’immunité passive est fréquent chez les veaux laitiers ou les chevrettes. Ainsi, une étude réalisée aux Etats-Unis, estimait sa prévalence à 19,2% dans les troupeaux laitiers. Une étude réalisée en France et portant sur les chevrettes (416 animaux) a montré que 58% des chevrettes présentaient un transfert d’immunité passive insuffisant. L’échec de transfert immunitaire est défini par une concentration sanguine

Procédures

6 prises de sang par veaux (dans l’heure suivant la naissance, puis 8 heures, 24 heures, 72 heures, 8 jours et 21 jours après la naissance. - 2 pesées (naissance et 21 jours). Compte-tenu de l'expérience et de l'efficacité des personnels chargées des prélèvements, la durée de ceux-ci est réduite au minimum (la contention dure deux minutes et la prise de sang moins de quinze secondes) ce qui permet de limiter le stress des animaux. Prélèvements de fèces à 8 jours au niveau de l'anus après stimulation de l'animal via la spatule de prélèvement présente dans chaque tube Sarstead. Ce prélèvement a une durée très courte, de l'ordre de la minute.

Impact sur les animaux

Le risque lié à une faible absorption des immunoglobulines de lactosérum pour les 8 veaux du lot expérimental a été pris en compte : 1/ en apportant un colostro-remplaceur dont les IgG restent majoritairement d’origine colostrale (100 g sur 160 g) 2/ en utilisant un aliment d’allaitement supplémenté en IgG pendant les 20 jours suivant de façon à renforcer l’immunité locale des animaux durant la période la plus critique (« trou immunitaire »).

Devenir

Tous les animaux retournent dans l'élevage et seront réutilisé dans d'autres expérimentations.

Remplacement

Il n’existe pas de modèle in vitro robuste pour l’étude du transfert d’immunité passive chez le veau. Contrairement aux autres espèces, les bovins, ovins et caprins sont totalement dépourvus d’anticorps à la naissance en raison de l’absence de transfert d’anticorps transplacentaire. Les immunoglobulines G (IgG) présentes dans le colostrum permettent de transmettre l’expérience immunologique de la mère au nouveau-né (immunité passive) en attendant que celui-ci développe sa propre immunité (immunité active). Il est essentiel de réaliser l’expérimentation sur une des espèces cibles. L’espèce bovine a été choisie car la taille des animaux nouveau-nés permet de réaliser des prélèvements sanguins dès la naissance sans nuire à l’animal.

Réduction

Le nombre d’animaux par traitement est limité à 8 individus car il s’agit à ce stade des connaissances de valider que les immunoglobulines extraites du lactosérum peuvent être absorbées et rejoindre la circulation sanguine. Le pourcentage d’absorption des immunoglobulines du colostrum est généralement compris entre 20 et 35 %. Sur la base d’une absoption moyenne de 30 % et d’un apport de 160 g d’IgG, la teneur sanguine théorique en IgG du lot témoin est de 13.3 g/L. Pour obtenir des résultats statistiquement significatifs, le protocole nécessite 2 lots de 8 individus.

Raffinement

La contention des veaux et les prélèvements sanguins sont des éléments capitaux à la maîtrise de la douleur. Ces opérations sont toujours effectuées par les mêmes personnes formées et habituées à ces manipulations. Compte-tenu de l'expérience et de l'efficacité des personnels chargées des prélèvements, la durée de ceux-ci est réduite au minimum (la contention dure deux minutes et la prise de sang moins de quinze secondes) ce qui permet de limiter le stress des animaux. Pour toutes les prises de sang, nous prévoyons une anesthésie locale au niveau de la jugulaire 10 minutes avant la prise de sang. Ces prélèvements sont espacés dans le temps (à 1 heure, 8 heures, 24 heures, 72 heures, 8 jours et 21 jours après la naissance). Les équipements de distribution des aliments (distributeurs automatiques de lait et de concentré) permettent de détecter toute anomalie au niveau de la prise alimentaire. Les animaux qui présenteraient des problèmes (diarrhée, sous-alimentation...) seront examinés et traités par le vétérinaire référent de l’élevage. Concernant le lot expérimental, l’apport d’IgG durant les 20 jours suivants la naissance est une mesure permettant de compenser le risque d’une non-absorption des IgG issues de lactosérum lors de la première heure après la naissance.

Choix des espèces

Les espèces bovine et caprine sont les plus susceptibles de recevoir des immunoglobulines de lactosérum en complément des immunoglobulines colostrales. L’espèce bovine a été choisie car la taille des animaux nouveau-nés autorise des prélèvements sanguins dès la naissance sans nuire à l’animal. Les veaux sont intégrés à l’expérimentation dès la naissance de façon à pouvoir administrer le colostro-remplaceur durant la première heure de vie, période durant laquelle la perméabilité intestinale permet un passage optimal des immunoglobulines vers la circulation sanguine.

288 poules vont être utilisées, dont 176 tuées pour prélever leurs organes et 112 renvoyées en élevage, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance léger. Une partie est isolée en cage individuelle jusqu'à six semaines, puis subit une prise de sang à l'état vigile suivie d'une mise à mort immédiate, pour mesurer l'effet d'une supplémentation en vitamine D3 sur la coquille et le squelette. Le porteur présente l'amélioration de la qualité des œufs et la réduction des fractures comme un gain pour le "bien-être" des poules et la "durabilité" des élevages, la France étant le premier producteur d'œufs en Europe. Il affirme qu'aucun modèle in vitro ne rend compte des interactions entre les organes du métabolisme calcique.

Objectifs

La poule pondeuse présente des besoins très élevés en calcium pour assurer la minéralisation de la coquille de ses œufs. Ce calcium provient de son alimentation, mais il doit faire l’objet d’un stockage intermédiaire dans l’os afin d’être mis à disposition de l’utérus pendant la phase nocturne de calcification de la coquille, quand la poule ne se nourrit pas. Ceci implique un cycle quotidien de remodelage osseux et peut conduire à des défauts de qualité de coquille et à une fragilisation progressive de l’os (ostéoporose). La vitamine D3 et ses métabolites sont des régulateurs majeurs du métabolisme calcique, dont l’apport est indispensable en alimentation des poules pondeuses. L’hydroxyvitamine D3 est une forme naturelle de la vitamine D3, issue de son hydroxylation hépatique. Elle est assimilable par voie alimentaire et à ce titre distribuée comme un additif bénéfique pour le statut minéral osseux, la qualité de la coquille et le statut immunitaire de la poule pondeuse. L’objet de la présente étude est de déterminer si une supplémentation précoce chez la poulette peut avoir un effet bénéfique sur son développement squelettique de la poulette, mesuré avant l’entrée en ponte (17 semaines), et aux étapes ultérieures sur la qualité osseuse chez la pondeuse et qualité de la coquille pendant toute sa période productive (20 à 100 semaines). Il s’agira d’autre part d’en expliciter les mécanismes sous-jacents, ce qui pourrait déboucher sur la proposition d’autres stratégies nutritionnelles et permettre d’identifier de nouveaux marqueurs du statut minéral osseux, utilisables en élevage.

Bénéfices attendus

Un meilleur ajustement des apports en vitamine D3 (forme et période d'administration) doit permettre d'améliorer simultanément la qualité sanitaire des œufs en améliorant la qualité des coquilles, la santé osseuse des poules et leur bien-être par la réduction de la fréquence des déformations ou fractures. Tout cela va concourir à l'amélioration de la durabilité des systèmes de production. La mise en évidence des mécanismes sous-jacents, outre son intérêt dans le domaine de la physiologie comparée, peut permettre d'envisager de nouvelles voies d’intervention ou d'identifier des marqueurs moléculaires utilisables pour évaluer des stratégies d'élevage ou d'alimentation variées.

Procédures

La première modalité s’applique à 24 animaux élevés en groupe qui seront soumis uniquement à un prélèvement sanguin à l'âge de 17 semaines, à l'état vigile pour éviter toute interférence avec les paramètres mesurés. La seconde modalité s’applique à 264 animaux qui seront soumis à une phase d'élevage en cage individuelle d’une durée maximale de 6 semaines. Parmi ces animaux certains seront soumis à un prélèvement sanguin, à l'état vigile pour éviter toute interférence avec les paramètres mesurés. Tous les animaux soumis à une prise de sang sont immédiatement euthanasiés pour permettre la collecte d’organes.

Impact sur les animaux

La capture, la contention et la prise de sang sont des stress pour l’animal, qui n’auront lieu qu’une seule fois dans cette procédure. Les animaux sont euthanasiés immédiatement après pour collecte d’organes. L’isolement en cage individuelle constitue un autre stress. Il ne sera imposé qu’une seule fois à un même animal pour une durée maximale de 6 semaines. Les animaux bénéficieront de la proximité de leurs congénères dans une même salle et de la mise à disposition d’un objet à picorer dans leur cage. Le retour dans le groupe après l’isolement pourrait constituer une autre source de stress avec un risque d’agressivité du groupe. L’expérience montre que ce risque est faible.

Devenir

Tous les animaux soumis à une prise de sang sont destinés à l'euthanasie pour prélèvement de tissus. Les animaux qui ne sont pas soumis à une prise de sang retournent en élevage.

Remplacement

La régulation du métabolisme calcique dépend d’effecteurs et de régulations hormonales intervenant à différents niveaux de l'organisme (utérus, os, reins, intestin et la glande parathyroïde) excluant le recours à un modèle in vitro ne considérant pas les interactions entre ces organes.

Réduction

Les données seront analysées par analyse de variance selon un modèle statistique incluant les effets du régime, de l’âge et du stade physiologique (dans le cycle ovarien quotidien). L’identification du stade dans le cycle ovarien est cruciale en raison de la forte variation des paramètres sanguins (calcémie, phosphatémie) et des régulations hormonales. Les études antérieures de l’équipe montrent que ces effets peuvent être détectés avec 8 poules par lot pour une puissance statistique de 90%. Nous faisons l’hypothèse de pouvoir ainsi identifier de nouvelles protéines impliquées dans la régulation du métabolisme calcique. Pour arriver à ce nombre à chaque stade du cycle ovulatoire, nous disposerons de 88 poules matures en cage individuelle à chaque âge. Les animaux n’étant pas au bon stade physiologique ne seront pas prélevés et seront remis en élevage de production d’œufs.

Raffinement

Les poules hébergées en groupe au sol bénéficient d’un milieu enrichi, notamment par des perchoirs. Les poules hébergées en cages individuelles pendant 6 semaines au maximum bénéficient d'un milieu enrichi par un jouet à picorer et de la proximité avec leurs congénères permettant des échanges visuels, olfactifs et auditifs. Les animaux seront l’objet de surveillance classique et toute manifestation de détresse ou de maladie prise en considération pour envisager le retrait des animaux (retour en élevage en groupe au sol) ou leur euthanasie si besoin.

Choix des espèces

L'élevage de poule est une activité économique d'importance pour la France, qui est le premier producteur d'œufs en Europe. Il n'y a aucune raison d'utiliser une espèce modèle différente. Les animaux sont des femelles jeunes et adultes. La production d’œufs se produit chez la poule pondeuse adulte, cependant l'intérêt de cette expérimentation est de tester l'effet d'un régime appliqué dès les stades précoces du poussin.

54 chats et 54 chiens vont être utilisés, gardés en vie et réutilisables, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance léger. Ils reçoivent des aliments contenant de nouveaux ingrédients protéiques, comme des insectes, des algues ou des levures, et subissent trois prélèvements de sang et des collectes d'urine, pour qu'un industriel de la nutrition animale confirme la sécurité de ces ingrédients. Le porteur indique que le protocole n'entraîne "ni douleur, ni souffrance" et que les animaux sont gardés en vie, le vétérinaire pouvant les retirer de l'étude en cas d'effet indésirable. Il affirme qu'aucune autre étude ne peut remplacer cet essai, mené selon les standards internes de l'entreprise et la norme AAFCO.

Objectifs

En tant qu’acteur majeur de la nutrition des chiens et des chats, nous nous assurons de la sécurité des ingrédients nouveaux que l’on incorpore dans nos produits en lien avec notre politique de développement durable, pour que les chiens et les chats vivent en bonne santé. Nous sommes amenés à envisager l'incorporation d'ingrédients pour aucune donnée scientifique sur le chien ou le chat n'est disponible. Ces nouveaux ingrédients lesquels peuvent avoir un intérêt nutritionnel spécifique ou être intéressants pour substituer certaines matières premières déjà présentes dans les aliments pour chiens et chats. Les standard internes de l'entreprise nécessitent qu'une première évaluation soit réalisée sur un petit nombre d'animaux avant de tester l'aliment avec le nouvel ingrédient sur un nombre plus larges d'animaux lors de test d'appétence ou de digestibilité.

Bénéfices attendus

Dans le contexte de diminution de la disponibilité des protéines de sources animales & végétales pour les animaux de compagnie, Des sources de protéines alternatives et durables sont nécessaires pour assurer un approvisionnement en ressources adéquat pour fournir des aliments sains pour les animaux de compagnie. L’objectif de ce protocole est de réaliser une première présentation aux chiens & chats de nouveaux ingrédients qui ont été soumis à une évaluation de risques et sont présumés sains mais où la connaissance n’est pas suffisante pour exclure l’apparition d’effets imprévus défavorables avec une certitude de 100%. Ce protocole est conçu pour fournir la preuve de la sécurité pour l’espèce cible tout en exposant aussi peu d’animaux que possible. Les ingrédients sont évalués à des niveaux d’incorporation dans les produits finis qui ne sont pas censés induire des effets néfastes. Cette stratégie vise à confirmer la sécurité de l’ingrédient et non pas à évaluer la toxicité ou bien à induire des courbes de doses-réponses. Les sources de protéines alternatives incluent une large gamme d’ingrédients potentiels, incluant ceux déjà utilisés dans l’industrie agroalimentaire mais non-utilisés par notre entreprise et des ingrédients comme des nouvelles plantes, protéines d’origine microbiennes (algues, levures) ou animales (insectes, …) qui ne sont pas encore utilisés dans l’industrie d’alimentation du chien & du chat.

Procédures

La recolte d'urine et prise de sang seront fait avec les animaux vigiles. Une analyse de la biochimie sanguine sera réalisée avant le début de la première étape et après les deux phases de 14 jours. Les paramètres pour les prises de sang incluent les mesures de la fonction rénale et hépatiques (urée, créatinine, phosphatase alcaline, albumine, gamma glutamyl transférase, glutamate-pyruvate transaminase, protéine totale, cholestérol, globuline, et bilirubine totale). L’hématologie inclura la numération des hématies et le dosage de l’hémoglobine, numération des globules blancs et plaquettes. D’autres paramètres spécifiques identifiés dans l’évaluation de risques préliminaires peuvent être requis en fonction des ingrédients. Une analyse d’urines (couleur, turbidité, pH, protéine totale, glucose, cétones, bilirubine et sang, densité spécifique et sédiment) sera réalisée avant et après chaque étape du protocole ou à la discrétion du vétérinaire. La collection d’urine se fera par collecte libre (free-catch) minimum 10 fois (avant et aprés chaque étape du project). La prise de sang sera fait 3 fois. Lors de prises de sang, le volume minimum nécessaire (comme spécifié par les laboratoires d’analyses) pour analyse les marqueurs sera prélevé : 4ml/prise. La collection d’urines devra prélever 5ml. La prise de sang sera fait pour personne expérimentéé o le vétérinaire et si l’animal ne se débat pas: -sur la phase de prélèvement uniquement : 15 secondes (maximum 30 secondes) -En incluant la phase de contention, de tonte, de désinfection et de prélèvement 2 minutes maximum.

Impact sur les animaux

Les animaux seront suivis quotidiennement par des techniciens animaliers et des vétérinaires à des rythmes réguliers et définis et continuent les sorties quotidiennes habituelles. Ce protocole n'entraîne ni douleur, ni souffrance. L'état d'anxiété lors de réalisation de 2 prises de sang pendant les périodes finales de 14 jours est minimisé par un personnel qualifié et des animaux habitués dans notre centre.

Devenir

Tous les animaux sont gardés en vie. Le vétérinaire référent en charge du suivi de l'étude est chargé de sortir l'animal de l'étude en cas d'effet indésirable constaté sur l'animal afin d'éviter toute aggravation d'éventuels problèmes de tolérance à l'ingrédient testé

Remplacement

Le protocole et les procédures utilisés sont conformes aux standards AAFCO et suivent le processus normal d’évaluation des projets R&D. De plus, aucune autre étude ne peut être utilisée comme alternative à celle actuellement en place.

Réduction

Ce protocole est conçu pour prouver la sécurité d’un ingrédient tout en exposant aussi peu d’animaux que possible. Ce protocole n’est pas conçu pour délivrer des données statistiques robustes. Le protocole commencera par exposer 3 animaux à l’aliment test pendant 4 jours. L’aliment test ne comprendra que 25% du taux d’inclusion maximum fixé par une étude de risque préliminaire durant cette première exposition. Une dose croissante de l’ingrédient dans l’aliment pour atteindre 150% de la cible sera ensuite intégrée jusqu’ à 7 animaux pendant 14 jours.

Raffinement

Les animaux seront suivis quotidiennement par des techniciens animaliers et des vétérinaires à des rythmes réguliers et définis et continuent les sorties quotidiennes habituelles. Ce protocole n'entraîne ni douleur, ni souffrance. L'état d'anxiété lors de réalisation de 2 prises de sang pendant les périodes finales de 14 jours est minimisé par un personnel qualifié et des animaux habitués dans notre centre.

Choix des espèces

Les chiens et les chats sont les espèces cibles de l'aliment Seulement des animaux adultes qui sont sains et exempts de maladie seront utilisés pour cet essai. Les animaux pourront avoir une période de transition entre des traitements vétérinaires (vaccins, vermifuges…) et le début du test afin que ces traitements n’interfèrent pas les résultats. La période de transition sera déterminée par un vétérinaire en fonction du traitement et les animaux seront nourris avec un aliment neutre pendant cette période.

6 400 poulets de chair vont être utilisés, tous tués à l'issue, dans des procédures impliquant un niveau de souffrance léger. La plupart reçoivent de la corticostérone, une substance non autorisée, ajoutée à leur aliment pendant une quinzaine de jours pour reproduire un stress métabolique et tester des solutions nutritionnelles destinées à la vente. Le porteur indique que cette hormone diminue l'appétit et la croissance, sans accroître la mortalité attendue. Tous les animaux sont ensuite euthanasiés puis envoyés à l'équarrissage pour éviter que des poulets traités à la corticostérone entrent dans la chaîne alimentaire.

Objectifs

En élevage, les poulets de chair sont confrontés à une multitude de facteurs de stress tels que des températures trop élevées, une densité d’élevage importante, la pression sanitaire, leur manipulation et le transport. Ces facteurs de stress interviennent tout au long de la période d’élevage ; Leurs effets sur les performances de croissance des poulets ont bien été étudiés. En tant qu’effecteurs finaux de l'axe hypothalamo-hypophyso-surrénal (HPA), les glucocorticoïdes (GC) participent au contrôle de l'homéostasie de l’organisme et à la réponse au stress, en stimulant la libération des réserves d'énergie en favorisant la mobilisation du glucose et la lipolyse. Chez les mammifères et les oiseaux, il a été démontré que la régulation à la hausse des GCs circulants était impliquée dans l’induction de stress oxydatif. Des études ont montré qu’une libération accrue de corticostérone (CORT), principal GC chez les oiseaux, était associée à une baisse de la croissance des animaux, un déséquilibre de la balance redox et une augmentation de la peroxydation lipidique dans le sang et certains tissus. L’objectif de ce projet est d’évaluer les bénéfices sur la croissance et la santé de diverses solutions nutritionnelles, administrées à des poulets de chair exposés à la corticostérone dans le but d’induire des perturbations métaboliques spécifiques au stress.

Bénéfices attendus

Les bénéfices attendus du projet sont la mise sur le marché d'une ou plusieurs solutions nutritionnelles s’inscrivant dans une stratégie de renforcement de la prévention sanitaire des élevages de volailles de chair.

Procédures

A l’exception des poulets qui composeront les traitements « témoin », les autres animaux de ce projet reçoivent de la CORT (substance non autorisée). La dose peut varier de 10 à 30 ppm maximum selon les essais. La supplémentation en corticostérone peut avoir lieu à partir de 9 jours d’âge, et sa durée n’excède pas 15 jours consécutifs. Cette supplémentation est réalisée via l’aliment, les animaux ne subissent donc aucune manipulation particulière pour cette administration. A chacune des applications de la procédure, 1 120 poulets seront supplémentés avec de la corticostérone.

Impact sur les animaux

L'activation de l'axe hypothalamo-hypophyso-surrénalien (HPA) est impliquée dans la baisse des performances des poulets de chair. La diminution du taux de croissance par la CORT est associée au contrôle de l’appétit (baisse de l’ingéré), une stimulation de la protéolyse, de la lipolyse et de la néoglucogenèse (augmentant ainsi les taux sanguins de glucose, d’acides aminés libres et d’acides gras libres). Aucun accroissement de la mortalité n’est attendu.

Devenir

A l’exception des poulets qui composeront les traitements « témoin », les autres animaux de ce projet reçoivent de la CORT (substance non autorisée). En considérant le risque de transferts inter-lots, la totalité des animaux inclus dans ce projet sera euthanasiée puis envoyée à l’équarrissage afin d’éviter toute erreur qui pourrait entrainer la présence d’animaux traités à la CORT dans la chaine alimentaire.

Remplacement

L’ensemble des mécanismes de régulation de l’homéostasie qui interviennent au cours de la croissance des animaux est extrêmement complexe et ne peut pas être modélisé ou reproduit in vitro.

Réduction

Le nombre minimal de répétitions (c’est-à-dire de parquets) est estimé à 10 par traitement expérimental, avec 8 traitements au total. Ceci correspond au nombre de répétitions nécessaires pour obtenir une différence significative de 3% sur le poids vif, avec un écart-type commun de 45 g sur ce paramètre, en prenant en compte une valeur seuil de significativité de 5%. Pour chaque essai, la dispersion des données sera évaluée selon des graphiques boites à moustaches afin d’identifier les données aberrantes. Après élimination des données aberrantes, plusieurs analyses de variance (ANOVA) à 1 ou 2 facteurs seront réalisées pour prendre en compte selon les périodes, l’effet du régime alimentaire et du niveau d’exposition à la CORT.

Raffinement

Pour l’ensemble des essais, les animaux sont placés en logement collectif. Mettre plusieurs animaux dans un parquet permet de mieux représenter l’élevage avicole standard en appliquant des conditions d’élevage observées sur le terrain. Un dispositif d’enrichissement du milieu de vie est disposé dans chaque parquet (rondelle ou autre objet pendu à une ficelle). L’état de santé des animaux sera vérifié quotidiennement par les techniciens. Les animaux présentant des fractures au niveau des pattes et/ou des ailes sont systématiquement écartés. Des points limites stricts et définis à l’avance seront appliqués tout au long du projet.

Choix des espèces

L’ensemble des mécanismes de régulation de l’homéostasie qui interviennent au cours de la croissance des animaux est extrêmement complexe et propre à chaque espèce animale. Elle ne peut pas être modélisée ou étudiée in vitro. Les poulets seront utilisés de 1 à 42 j d’âge maximum pour mimer un cycle de production classique.